PDF《IFCC-PT-005》

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10 IFCC-PT -001-059 IFCC-PT -001-141 附录 B 能力验证物品(样品)制备和均匀性/稳定性检验 B-1 能力验证物品(样品)制备报告 食品检验用铜绿假单胞菌质控样品研究报告

一、 摘要 铜绿假单胞菌是一种革兰阴性杆菌,也是临床最常见的非发酵菌,在自然界广 泛分布,可作为正常菌群在人体皮肤表面分布,还可污染医疗器械甚至消毒液,从 而导致医源性感染,是医院获得性感染重要的条件致病菌,具有易定植、易变异和 多耐药的特点. 本研究主要目的是通过铜绿假单胞菌质控样品制作、保存条件的研究,建立一套 制备铜绿假单胞菌检测能力考核质控样品的流程.依据CANS-GL03:2006能力验证样 品均匀性和稳定性评价指南、CNAS-GL29 标准物质/标准样品定值的一般原则和统计 方法、ISO/TS22117Microbiology of food and animal feeding stuffs ― Specific requirements and guidance for proficiency testing by interlaboratory comparison对质控样品进行储存稳定性、运输稳定性和样品均一性的验证,以确保对 参加实验考核结果评价的客观性和准确性.结果显示,本研究选择的铜绿假单胞菌冻 干保护剂对目的菌有良好的保护效果,可用于铜绿假单胞菌质控样品生产;

用本研究 选择的保护剂和冻干条件所制备的铜绿假单胞菌质控样品,在-30℃条件下放置95天后,样品中的铜绿菌的浓度依然达到10

3 CFU/样品,符合质控样品的储藏稳定性要求;

对24瓶制备的质控样品进行均一性测试显示,样品中铜绿菌的浓度均可达到102 CFU/ 样品以上,作为定性样品,符合均一性要求.

二、 目的 依据《CNAS―GL03能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》 、 《CNAS-GL29标准 物质/标准样品定值的一般原则和统计方法》 、 《ISO/TS

22177 Microbiology of food and animal feeding stuffs―specific requirements and guidance for proficiency testing by interlaboratory comparison》 、 《化妆品卫生规范》 (2007)

11 及相关文献开展化妆品检验用铜绿假单胞菌定性质控样品的研究工作.

三、 仪器与试剂 表1铜绿假单胞菌质控样品实验用主要仪器 名称 编号 型号 电子天平 GGP385 PL2002 高压灭菌器 GGP187 MLS-3780 生物安全柜 GGP079 THERMO1389 恒温培养箱 GGP124 205050GC 冷冻干燥机 GGP076 LL1500 涡旋混合器 GGP333 SA8 全自动微生物 螺旋加样系统 GGP132 EDDYJET/ FLASH AN 表2铜绿菌质控样品实验用主要培养基与试剂 名称 来源 批号 MH琼脂培养基 BD

1312212 无菌FBS(胎牛血清) GIBCO

8172881 BSA MP

2121 海藻糖 国产

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四、 铜绿假单胞菌质控样的研制及验证方法

1、 冻干保护剂成分研究 将铜绿假单胞菌(CMCC10211)划线接种于 TSA 平板,37℃培养过夜.用无菌 棉签从平板上刮取菌苔,制成菌悬液.冻干保护剂采用小牛血清、海藻糖、牛血清 白蛋白,添加菌悬液混匀,进行冷冻干燥,制成

10 3 浓度,进........