PDF《环状 RNA hsa_circ_0082626 的特征分析及过表达载体》

医学研究生学报

2019 年5月第32 卷第5期JMed Postgra, Vol.

32, No.5, May,

2019 论著(基础研究) 环状RNA hsa_circ_0082626的特征分析及过表达载体 构建 潘劲辉, 姚文霞, 林海, 牛秋玲, 罗远卫, 梁敏, 周新科 [ [ [摘要] ] ] 目的 环状 RNA 是目前非编码 RNA 的研究热点, 文章旨在研究由抗病毒基因 ZC3HAV1 基因转录而来的环状 RNA hsa_circ_0082626的基本特征以及过表达载体的表达效果. 方法 利用反向剪切位点的验证、 RNA酶消化试验和提取 细胞质、 细胞核 RNA 进行细胞内分布定位研究了 hsa_circ_0082626 的基本特征, RNA 酶消化试验中将样品分为 RNase R 处理 组与对照组, RNase R 处理组加入

20 U (2 U/μg) 的RNase R, 对照组用等量 ddH2O 替代, 以此检测经 RNA 酶处理后的表达量变 化.转染

24、 48和72 h后分别收集以转染重组质粒的细胞为过表达组、 未经转染的细胞作为阴性对照组, RT-qPCR 检测环状 RNA 表达效果. 结果 与对照组比较, RNase R 处理组 ZC3HAV

1、 GAPDH 表达均降低 (0.144±0.002 vs 1.000±0.016,0.772± 0.058 vs 1.000±0.122,0.077±0.009 vs 1.000±0.164, P