PDF《中华人民共和国专业标准》

中华人民共和国专业标准 熟料消化率测定法(试 行) SB/T 10319-1999 Determination of digestibility of steamed material 本方法适用于酿造酱油时在制品熟料的消化率测定.

消化率系指原料经蒸煮后,其中蛋白质可被酶分解为水溶性肽类或氨基酸的百分比, 以此来衡量蒸煮的质量.

1 试剂与仪器 所用试剂都为分析纯. 1.1 酶液 (10%种曲浸出液) 取约 20g 新鲜种曲,放入锥形瓶中,加20mL 50%酒精 (酒精: 水=1∶1)混匀,加180mL 水搅拌均匀,置于 40℃水浴中浸泡 1h,频频摇动,用慢速滤纸或离心机分离 (1500~2000r /min)5min,上清液或滤液用福林法测定蛋白酶活力在

100 单位/mL 以上;

但酶液的全氮含量 须在 0.06%以下,如不在此范围内,则须加以调节.酶液不必每次都在测定前进行制备.在 几天内可根据需要量,一次制备好,调整好酶活力范围以后置冰箱中备用,但也不宜超过三 天. 1.2 pH 7.2 磷酸盐缓冲液 甲液: 称磷酸二氢钠 (NaH2PO4・2H2O) 31.2g,用蒸馏水定容至 1000mL. 乙液: 称磷酸氢二钠 (Na2HPO4・7H2O) 53.7g,用蒸馏水定容至 1000mL. 取甲液 28mL,乙液 72mL 混合即成 pH 7.2 的磷酸盐缓冲液. 1.3 高速组织捣碎机,型号 DS -1(上海标本模型厂制造)功率 200W,转速 10000~12000r /min. 1.4 水浴锅 1.5 离心机 1.6 测定酶活力、全氮所用试剂、仪器见有关标准 (ZB X 66030-

87、ZB X 66026-87).

2 操作方法 2.1 熟料浆制备 取100g 熟料放入高速组织捣碎机中,加蒸馏水 300mL.盖好盖子,合上开关,捣搅 1min 后停机,将飞溅在容器壁上的熟料颗粒用角匙刮下,再继续开机捣碎 2min,使熟料捣成均 匀的料浆.停机、开盖,将料浆倒入烧杯内.用四层湿纱布盖好备用. 2.2 测定步骤 2.2.1 精确称取熟料浆 6g 左右 (精确到 0.2mg)于150mL 锥形瓶内,加入 75mL 酶液,再加 入pH7.2 缓冲液 20mL 摇匀,在瓶口塞上橡皮塞后,置于水浴锅中.55℃保持 2h 取出,拔下塞 子,放在已煮沸的沸水浴中再煮沸 10min.取出冷却,转入 100mL 容量瓶,定容至 100mL.用 慢速滤纸过滤,或离心分离 10min(1500~2000r/min).弃去开始滤出的滤液 5mL 左右.用 移液管精确吸取滤液或上清液 10mL,严格按照全氮测定法测定水解液的全氮(TN 水). 2.2.2 精确吸取酶液 10mL,并测定其全氮含量(TN 酶). 2.2.3 精确称取熟料浆 2g 左右 (精确到 0.2mg),测出料浆的全氮含量 (TN 料). www.grainnet.cn

3 计算 TN 水*100 -T N 酶*75 消化率(%) =*100 T N 料*6 式中:T N 水*100――100mL 水解液所含总氮量, g;

T N 酶*75 ――所加 75mL 酶液所含的总氮量, g;

T N 料*6 ――6g 熟料浆所含总氮量, g.

4 注意事项 4.1 料浆要尽量捣碎均匀,捣碎后要及时称量.水解用料浆和测定全氮用料浆要紧接 在一起称量,以免水分蒸发而引起误差. 4.2 酶液可预先制备好.捣碎称量、测定酶液全氮、测定料浆全氮可在酶液浸出过 程中和水解过程中交叉进行,以便压缩总的测定时间. 4.3 为使浓度呈梯度分布的上清液混合均匀,离心结束后须把上清液倾出摇均后再吸 取,为防止倾出时把沉淀带出,可把上清液再用快速滤纸过滤一次,减少测定误差. 附加说明: 本标准由商业部副食品局提出. 本标准由上海市酿造科学研究所起草. 本标准主要起草人须凤高. 中华人民共和国商业部 1987-11-20 批准 1988-07-01 实施 www.grainnet.cn