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5 7 这些研 究中, 异 宗结合食 用菌 的单 核原生质体和 次级 同宗结合食 用菌 的同核原 生质体 技术是 一 个重要 的研究方 向.

1 . 食用菌单 核和 同核原 生质体的发 现 在异宗结合 和次级 同宗结合 的食用菌 中, 常规 水平的杂交 育种和细 胞水平 的原 生质 体技 术是 目前 食用菌苗种 遗传 改 良的两个 主要途 径 而在这两种途径 中, 又都 选择 了单核 体和同核 体作为主要 的基本遗 传材料 , . 在 上述 两种具 有不 同性结台方 式的食 用菌中, 常规方 法是 从野 外采集或经人工 栽培 得到 的子实体 中收集 孢子 , 通过孢子 萌发得到单核体或 同核体 , 这类单核体 或同核体称 为孢子 单核 体( S p o r u l a t e d mo n o ka r y o n ) 和孢 子 同核体 ( S p o r u l a t e d h o mo k a r y o n ) . 它具 有 三个 基本的 遗传特征 :

1 . 它是 在这些食用菌 生活史的有性世代 中形 成的单 核单倍体 的有性后 代;

2孢子单 核体和孢子 同核体具有 不同形式 的交配型;

如香菇孢子单核体具 有四种交配 型(Ax Bx , Ay By . Ax By . Ay Bx ) . 蘑 菇孢子 同核体具 有两种形式的交配型( A+和A一) . 在 每一 个孢子 单核体或 同 核体 中只存在一 种形 式 的交配 型;

3. 这些孢子单核体或 同核体都是 不育的 , 即不 能直 接形成子 实体 . 必须经过两种不 同交配型 的孢子单 核体杂交形成异核体才 能发 育形成子实体. 鉴于单核 体和 同核体在食 用菌遗传改 良中的重要性 人 们在 了解其基本 遗传 特性的 同时 并不满 足于 常规的获取方法 , 还在不 断地 寻求获取大量单核体 和同核体的途径. Ha n d e r 用显微外 科手术 的方法 . 即在菌 丝有 丝分 裂形成锁状 联合 的过 程中. 通 过显 微操 作.使顶端 细胞( t e r mi n a l c e l

1 ) 和钩联细胞( h o o k c e l

1 ) 被切割 下来, 此时 . 次末端细胞( p e n u l t i . ma t e c e l

1 ) 是 单核状态, 把 它切割 下来转移 到新 的培养基 中, 可获得单核菌 丝. 这种方 法要 求较 精细的显微 外科技 术. 试验结果表 明, 切 割下来 的次末端细胞存活率很 低.Fries和As c h a n 等利用 调节 培 养基成分和 外科手术 结合的方 法得 到了单核体 , 井得 到 了其变种 . 在应 用化学 试剂 上也有许多 尝试 . . Mi l e s 和Ra p e r 在1

3 种术 腐担子 菌的许多 菌株 中, 采 用添加 牛磺 胆酸钠 和胆 酸的方诖 . 得 到较 高 比例 的单 核菌丝 . Ta k e ma r ~ 和Amb u r g e n y ~

9 证实 了胆酸 钠和牛胆汁 以及 其它一些类 似的化 学试剂时单核化作用的影响 . 另外 , Pa r a g 采用多粘 菌素0o l y mi x i n ) 作用于裂褶茵( S c h i z o p f f m C O I R I R ~ R e ) 发现 可以选择性杀死 双核菌丝 中 耐受性 较弱 的核 c . 虽 然人们尝试 了以上种种化 学杀核 的方法 . 但一直 设有一 种化学试 剂可 以 达到较 为满意 的单核化 结果.

1 9

8 2 年L e a

1 .

1 a r a 提出 了以高甘氪酸 , 低磷、低镁含 量的 p e : p r o n e . P 培养基来培 养研 磨后 的平菇、 金针菇 的双核菌丝 . 得到 比率高 达1

0 0 的单核菌丝 . 但Le a

1 .

1 a r a 认 为造成 这种 现象 的机 理 尚不 清楚 . 估 计这种 培养 基可能 与阻止 双 核菌 丝生 长有 关.井推测 在这种培养基 中生长 的菌 丝, 可能会分泌 出一种阻止锁 状联 合形成 的物质 . 以上各 种方法 . 由于使 用上的局 限性 . 并没有在食用 菌上得 到广泛 的应 用, 因此 . 从子实体 中收集担孢子仍 然是 目前 食用菌遗传和育种研 究中得 到单 核体和 同核体 的主要方法.