PDF《阻断 pannexin-》

阻断 阻断pannexin- pannexin-1 1可减轻肾脏组织炎症细胞浸润和缓解顺铂诱导 可减轻肾脏组织炎症细胞浸润和缓解顺铂诱导 的急性肾损 的急性肾损伤 伤 刘崇斌, 黄柳维, 李彩珍, 沈燕婷, 王骏南方医科大学南方医院肾内科, 广东省肾脏病研究所, 器官衰竭国家重点实验室, 肾脏病国家临床研究中心, 广东 广州

510515 Blocking pannexin-1 alleviates cisplatin-induced acute kidney injury in mice by reducing renal inflammatory cell infiltration LIU Chongbin, HUANG Liuwei, LI Caizhen, SHEN Yanting, WANG Jun National Clinical Research Center of Kidney Disease, State Key Laboratory of Organ Failure Research, Guangdong Provincial Institute of Nephrology, Department of Nephrology, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China 摘要: 目的 探讨阻断pannexin-1在顺铂致急性肾损伤中的作用.

方法 将26只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、 顺 铂模型组、 顺铂+Carbenoxolone 处理组.顺铂模型组、 顺铂+Carbenoxolone 处理组予顺铂

20 mg/kg 腹腔注射

1 次, 顺铂+ Carbenoxolone处理组于顺铂处理前30 min、 处理后

24、

48 h分别腹腔注射Carbenoxolone

20 mg/kg, 所有组于顺铂处理72 h处 死小鼠, 留取血浆及肾组织样品进行下一步检测.RT-qPCR及Western blot检测肾组织内pannexin-1的表达水平;

检测血浆 BUN、 Scr水平评估肾功能;

PAS 染色评估肾组织病理学改变;

免疫组化检测肾损伤分子1 (KIM-1) 表达水平及RT-qPCR检测肾 损伤分子1与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (NGAL) mRNA水平评估肾小管损伤情况;

免疫荧光检测肾组织F4/80+ 巨噬 细胞及CD4+ T细胞浸润水平;

RT-qPCR及Western blot检测肾组织pannexin-1的mRNA及蛋白表达水平;

用终浓度50 μmol/L 顺铂刺激人近端小管上皮细胞株HK-2细胞

4、

6、

12、

18、

24 h构建体外顺铂致急性肾损伤模型;

RT-qPCR及Western blot检测 HK-2细胞pannexin-1的表达水平.结果 与对照组相比, 顺铂模型组肾组织pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达上调 (P< 0.005) ;

体外实验结果显示, 与对照组相比, 顺铂模型组的pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达水平上调 (P