PDF《不同部位灵芝及子实体提取物中 总三萜酸含量测定》

100 mL,

30 ℃磁力搅拌

30 min, 过滤, 获醇提取液 1;

残渣加

200 mL 50% 乙醇, 30℃ 磁 力搅拌

30 min, 过滤, 得醇提取液 2, 合并醇提取液

1、

2 并浓缩, 浓缩液加

50 mL 氯仿萃取, 重复

3 次, 氯 仿萃取液中加

50 ml 5% NaHCO3 萃取, 重复

3 次, NaHCO3 液用 2mol/L HCl 调pH 至3, 在酸性溶液中加 氯仿

50 mL 进行萃取, 重复

3 次, 酸性氯仿萃取液合并浓缩至干, 放置干燥器内

24 h, 即得灵芝总三萜 酸, 精确称重, 计算: 灵芝总三萜酸含量 = 灵芝总三萜化酸重量( mg ) /样品重量( g) . 1.

3 灵芝总三萜酸的 HPLC 条件 采用 Bechman System Gold 高效液相色谱系统, 包括

125 液相泵和

168 DAD 检测器. 色谱柱: Hyper- sil Gold C18(

250 mm * 4.

6 mm,

5 μm) ;

流动相: 2% 乙酸∶ 乙腈 = 2∶ 1;

流速: 1.

0 mL/min;

检测波长:

252 nm;

进样体积:

20 μL;

柱温:

27 ℃. 图1灵芝不同部位总三萜酸含量

2 结果2.

1 灵芝不同部位的总三萜酸含量比较 分别取灵芝子实体( GL- F) 、 孢子( GL- S) 、 液体培养菌 丝体( GL- M) 、 子实体中的菌盖( GL- P) 和菌柄( GL- ST) , 粉 碎后按 1.

2 方法制备, 计算灵芝总三萜酸含量. 结果显示 GL- F 含总三萜酸( 8.

58 ± 0. 25) mg /g, GL- S 的总三萜酸含 量为( 3.

48 ± 0. 03) mg /g, 而GL- M 的总三萜酸含量最少, 仅有( 1.

75 ± 0. 09) mg /g( 图1) . 经t检验, GL- F、 GL- S、 GL- M 三者两两比较差异达极显著水平( p <

0. 01) . GL- P 总三 萜酸含量为( 12.

62 ± 0. 22) mg /g, GL- ST 的含量为( 7.

66 ± 0. 08) mg /g( 图1) , t 检验两者差异极显著( p <

0. 01) . 表1市售

10 批灵芝子实体总三萜酸含量比较 批次 灵芝三萜酸含量( mg/g) RSD( % )

1 12.

62 1.

75 2 10.

62 3.

66 3 7.

66 3.

79 4 16.

39 3.

24 5 10.

02 5.

58 6 9.

80 4.

88 7 4.

27 5.

83 8 8.

27 4.

88 9 4.

34 4.

88 10 4.

49 5.

64 2.

2 市售灵芝子实体总三萜酸含量比较 将市售

10 批灵芝子实体分别粉碎后按 1.

2 方法制备, 计算 灵芝总三萜酸含量. 结果表明

10 批灵芝子实体中总三萜酸含量 最高达( 16.

39 ± 0. 58) mg /g, 最低仅为( 4.

34 ± 0. 21) mg /g;

有4批灵芝总三萜酸含量高于

10 mg /g,

3 批次的含量却低于

5 mg /g, 不同灵芝子实体的总三萜酸含量差异大( 表1) . 2.

3 子实体提取物中灵芝总三萜酸含量的比较 将各提取物按 1.

2 方法制备, 计算灵芝三萜酸含量. 结果由 高至低如下: GL- AW∶ ( 208.

70 ± 5. 54) , GL- WA ∶ ( 184.

46 ± 3. 75) mg /g, GL- WW∶ ( 134.

42 ± 5. 85) mg /g, GL- CW∶ ( 123.

07 ±4. 99) mg /g. t 检验, GL- AW 和GL- WA 两者总三萜酸差异显 著( p <

0. 05) ;

而GL- WW 和GL- CW 总三萜酸含量无统计差异( p >

0. 05) , 但两者分别与 GL- WA 或GL- AW 比较总三萜酸含量均差异极显著( p <

0. 01) . 灵芝子实体提取物所含的灵芝总三萜酸含量因提取方法不同而异, 但总三萜酸含量均远高于未经 提取的灵芝子实体( GL- F) 中的含量, GL- F 的总三萜酸为( 12.

62 ± 0. 22) mg /g, 其提取物总三萜酸含量 则是它的

9 ~

16 倍( 图2) . 2.

4 灵芝总三萜酸的 HPLC 的初步分析 HPLC 图谱峰显示, 灵芝子实体和孢子有

23 个共有峰, 两者所含的三萜酸 74% 的成分相同, 而菌丝 体的三萜酸的成分较前两者差异大( 表