PDF《BamHI》

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网址:http://www.beyotime.com 碧云天网站 微信公众号 BamHI 产品编号 产品名称 包装 D6053 BamHI 2000U 产品简介: ? BamHI内切酶为进口分装,基本信息如下: 识别序列 缓冲液兼容性(%) 酶切温度 失活条件 甲基化干扰? G^GATCC 1X BamHI 1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X Y 37?C 80?C 20min** 无CCTAG^G

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100 20-50 50-100* 100* 50-100 *,Star activity,当酶量5倍或以上过量时会产生星号活性,即产生非特异性酶活性. **,该条件下仅能失活部分BamHI酶. ? 酶储存液组成为:10mM Tris-HCl (pH7.4 at 25?C),200mM NaCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.15% Triton X-100,0.2mg/ml BSA and 50% glycerol. ? 1X Buffer BamHI 组成为:10mM Tris-HCl (pH8.0 at 37?C),5mM MgCl2,100mM KCl,1mM 2-mercaptoethanol,0.02%Triton X-100,0.1mg/ml BSA. ? 1X Buffer Y组成为:33mM Tris-acetate (pH7.9 at 37?C),10mM magnesium acetate,66mM potassium acetate,0.1mg/ml BSA. ? 酶切和连接效率:50倍过量的本内切酶消化1小时,>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(recut). ? 活性单位定义:在37?C,50微升反应体系中反应1小时,将1微克的λ DNA完全分解的酶量定义为1个活性单位,即1U. 包装清单: 产品编号 产品名称 包装 D6053-1 BamHI (10U/?l) 2000U D6053-2 10X Buffer BamHI 0.3ml D6010Y 10X Buffer Y 1ml ― 说明书 1份 保存条件: -20?C保存. 注意事项: ? 内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20?C保存. ? 如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题. ? 特别注意:甘油含量大于5%,低盐浓度,pH >8.0或酶大大过量(约20倍以上)可能会导致星号活性,即产生非特异性酶切. ? 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内. ? 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作. 使用说明: 1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行: 待酶切DNA 不超过1?g 双蒸水或Milli-Q水 适量 10X Buffer BamHI 2?l BamHI 0.5-1?l 总体积 20?l 37?C孵育1小时或更长时间 说明:请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶,加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混匀.通常参考上述条件 孵育1小时已经足够,但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响.如果酶切较长时间甚至酶切过夜,可以使用更少 量的酶.待酶切DNA量较大时,可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系. 2. 双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系.如果没有合适的缓 冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应.

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2 D6053 BamHI 400-1683301/800-8283301 碧云天/Beyotime 使用本产品的文献: 1. Li X, Guan Y, Li Y, Wu D, Liu L, Deng Q, Li X, Wang Z, Liu G. Effects of insulin-like growth factor-1 on he assembly and secretion of very low-density ipoproteins in cowhepatocytes in vitro. Gen Comp Endocrinol.

2016 Jan 15;

226:82-7. Version 2016.11.03