PDF《使用说明书》

『注意事项』 1.

引物设计对成功扩增十分关键. 除用于 SNP 分型外, 尽量以保守区设计引物. 引物至少包括 F3/B3 和FIP/BIP,加入环状引物 Floop/Bloop 可以使反应速 度大大提高.应优化引物序列、GC 含量和尽量避免二级结构.反应中各个 引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响. 建议先将所有引物混合在一起, 配制成 10?浓度以方便使用. 2. 1?RT-LAMP Mix 中已含有 8mM Mg2+ , 这可满足多数扩增反应. 如特殊需要, 可自行补加至合适浓度. 3. LAMP 扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点. 但太高的灵敏度使得其比普通 PCR 扩增更加容易污染导致假阳性. 因此, 必 须高度重视扩增产物的污染.常规措施包括严格的实验分区、添加 UNG 和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法.实验室 一旦遭到污染,所有相关试剂必须全部更换,必要时还得更换实验室. 4. 严防操作环境、使用的容器耗材和试剂的 RNase 污染.所用器具与耗材进行 无RNase 处理.操作过程中勤换手套. 5. 要确证扩增的为目标基因, 可以使用特定的限制性酶切和/或Southern 杂交. 6. 本产品仅供科研使用.请勿用于医药、临床治疗、食品等用途. 『技术支持信息』 如有任何问题或欲索取更多产品信息,请Email 至[email protected];

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网址:http://www.meilaibo.com 产品编号:LAR-50 MyLab? 等温扩增检测系列 RT-LAMP 通用型 RNA 快速扩增试剂盒 Ver 1.2 使用说明书 北京美莱博医学科技有限公司

2015 年5月北京美莱博医学科技有限公司 MyLab? RT-LAMP 通用型 RNA 扩增试剂盒使用说明书

4 『规格』50T. 『背景』逆转录环介导等温扩增技术(Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification, RT-LAMP)是一种新颖的 RNA 扩增方法.其基 本原理是采用 4/6 条特异引物(针对基因的 6/8 个区域)及一种具有链置 换活性的 DNA 聚合酶和 AMV 反转录酶, 在60~65℃左右对 RNA 进行同 步反转录及等温扩增,短时间扩增效率可达到

109 ~1010 个拷贝. RT-LAMP 具有高特异性、 高效性、 快速、 简便、 易检测等特点. RT-ULAMP 是我公司在 LAMP 基础上改进开发的一种技术, 它在尽可能保留了 LAMP 的优点的同时,降低了扩增产物污染机会和假阳性率. 『用途与特点』RT-LAMP通用型RNA扩增试剂盒可以用于一切与LAMP相关的快速 RNA等温扩增技术.其中,2?RT-LAMP Mix包含了除酶、引物和模板外的 所有成份,使用十分方便;

优化的酶配方,使得扩增更加快速高效. 『组成及保存条件』 编号 试剂盒组成 体积(50T) 保存条件

1 2?RT-LAMP Mix * 500μl -20℃

2 RT-LAMP酶混合物 100μl -20℃

3 MgCl2(25 Mm) 200μl -20℃

4 对照引物Mix(10?) 10μl -20℃

5 对照模板RNA 10μl