PDF《文章编号]1》

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4 J Be n g b u Me d C o i l , J a n u a r y

2 0

1 0, Vo

1 .

3 5, N o .

1 [ 文章编号]1

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0 3 ・基础医学 ・ 过量维 A酸致昆 明小 鼠腭裂 动物模型 的建立及意义 尹海燕 , 刘凯.卓煜 娅',刘桐.孙美群 . 邹维艳 [ 摘要] 目的: 建立维 A酸诱导的发生率较高、 易于获得并可用于腭裂发生 机制研究 的动物模 型.方法: 采用致畸物全反式维 A酸(atRA) 作用 于昆明小 鼠( 对照组采用等剂量溶剂) , 观察不 同剂量 和不同给药时问 的胚 鼠腭 裂畸形 发生率及腭部组织 的 光镜结构特点 , 确定诱导腭裂发生的最佳作用条件.结果: 在孕

1 0天给予

8 0 m g / k g 剂量 a t R A诱导昆明小鼠腭裂发生率最 高为100.0%(P<

0 .

0 1 ) , 为理想 的腭裂动物模型 , 光镜结果显示 , a t R A诱 导的腭裂为小腭. 结论 : 成 功建 立了 a t R A致腭裂发生 分子机制研究 的动物模 型,为进一步研究腭裂畸形的分 子机制奠定了基础. [ 关键词]维 A酸 ;

腭裂 ;

动物模型 ;

小鼠[中国图书资料分类法分 类号 ]R

9 8

6 ;

R

7 8

2 .

2 2 [ 文献标识码 ]A 先天性腭裂的发病机制复杂 , 致病因素多样 , 一 般认为是一种多基 因易感性疾病 , 现被大多数学者 认为是基因和环境联合作用引起 , 其发病机制 目前 尚未明确.稳定 的腭裂动物模型对研究人类腭裂的 形成原因、 演变机制及预防具有重要意义.通过对 一 些化学药物产生腭裂的研究 , 已能初步指出和解 释腭裂的发生及其致畸机制….本实验拟通过在 特定妊娠时期给予昆明小 鼠全反式维 A酸( a t R A) , 通 过对胚胎 发育 的渐 进性 形态学观 察,揭示 腭发育及腭裂形成过程 , 为后续化学物致 畸分子机制的研 究提 供基础 .

1 材 料与方法

1 .

1 实验动物 成年未经产雌性昆明小 鼠, 体重

2 5~

3 5 g , 购 自山东大学实验动物中心.

1 .

2 试剂80mg/mlatRA, 芝麻油悬液(atRA购自美 国Sigma公司,芝麻油 为 市售 优质品),临用时配成

0 .

8 %混悬液 .

1 .

3 动物模型建立方法 健康成熟未经产雌性昆 明小鼠

8 0只, 常规饲养 , 颗粒食料, 自来水饮水 , 明 暗周期各

1 2 h , 室温

2 0~

2 2 q C.下午 6时小 鼠按 雌雄2:1合笼 , 第 2天早 上 阴栓 阳性者 为 孕天 数(gestationday,GD) 0天.参照有关文献 . , 并考虑腭裂畸形发生率 、 母 鼠流产率等 因素 , 将获取的

2 6只孕鼠随机分为实验组和对照组 , 实验组

2 0只, 再随机分 为 5组, 每小组 4只, 其中3组分 别于GD

8、GDI O和GD12天下午

1 时一次性灌服全反式 [ 收稿 日期 ]2

0 0

8 ―

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2 3 [ 基金项 目]山东省 自然科 学基金资助项 目( Y

2 0

0 5 C

6 3 ) ;

蚌埠医学 院科研课题项 目资助( B Y

0 9

0 4 ) [ 作者单位 ]1 . 蚌埠医学院组织与胚胎学教研室,安徽蚌埠233030;

2.山东大学 组织学 与胚胎学 教研室 , L l I 东济南250012[作者简介]尹海燕(

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8 1一) , 女,硕上, 助教. a t R A芝麻油悬液, 剂量均为

8 0 mg / k g .另外两组则 分别与 G D

1 0天下午 1时一次性灌服 a t R A芝麻油 悬液 , 剂量分别为

6 0 m g / k g 和100mg/kg.对照组 6只,再随机分为 3个小组 , 每组 2只, 分别于 G D

8 、 G D

1 0和GD12天下午 1时一次性灌服与实验组等 剂量 的芝麻 油.在GD16天颈椎脱 臼处死实验组 和对 照组母 鼠, 从子宫内取出胚胎 , 解剖显微镜下对胚胎进行观 察, 确定 有无腭裂 畸形.计数胚胎总数、 腭裂胚胎 数,计算腭裂的发生率.部分实验组和对照组 G D