PDF《西瓜种传枯萎病病原菌鉴定及其防控方法》

C1000 PCR 仪, 美国Bio-Rad公司;

DYY-6C电泳仪, 北京六一仪器厂;

NIKON80i 显微镜, 日本尼康公司;

种子干热处理 机, 现代农装科技股份有限公司;

PRX-450D-30恒温 光照培养箱, 浙江联合赛福实验仪器科技有限公司. 1.2 方法 1.2.1 病原菌的分离纯化及致病性测定 病原菌的分离纯化: 采用常规组织分离法从典 型发病幼苗的病健交界处取 4~5 mm*4~5 mm 的小 块组织, 在75% 乙醇溶液中浸泡 2~3 s, 然后用灭菌 水冲洗

3 次, 用灭菌滤纸吸干水分, 放在 PDA 平板 上25℃恒温培养 2~3 d, 将分离菌株单孢纯化后转 入PDA培养基作为菌种保存备用 (方中达, 1998) . 菌株的致病性测定: 采用柯赫氏法则对分离菌 株进行致病性验证.将分离纯化的菌株接种在 PDA培养基上, 在25℃条件下培养5 d, 加适量水搅 拌成菌泥, 将30 粒京颖西瓜种子与 1/2 个平板的菌 2期 耿丽华等: 西瓜种传枯萎病病原菌鉴定及其防控方法

331 泥混合在一起, 播种在直径为

9 cm 的小育苗盒中, 以不接种病原菌的种子作为对照.育苗盒最底层铺 2/3育苗盒高度的灭菌蛭石, 第2层均匀放置30粒京 颖西瓜种子, 第3层覆盖 1/3 育苗盒高度的灭菌蛭 ........