PDF《魏智清GABA、牛磺酸和 pH 值影响蝌蚪耐缺氧能力的研究》

1 材料和方法

1 .

1 实验材料及药品 实验动物为花背蟾蜍 (B ufo raddei )的蝌蚪 ( tadpoles), 采于宁夏银川市西夏区一水塘, 实验前 在室内用曝气处理自来水暂养

7 d , 用煮熟的鸡蛋黄 喂养.选择大小一致、 体重相近、 游动正常的健康蝌 蚪进行实验.蝌蚪生活水体温度均为 (

20 .

0 ? 115) e .牛磺酸 (批号 20021024)、 B- 丙氨酸 (批号20020906)、 GABA (批号 20040629) 均为中国医 药集团上海化学试剂公司产品.

1 .

2 实验方法

1 .

2 .

1 牛磺酸对蝌蚪耐缺氧能力的影响 用50 mL三角瓶, 对照组装满自来水, 实验组分别加入质 量分数 为0105%、0 .

1 % 、0 .

2 %、0 .

3 %、0 .

4 %、

015 % 的牛磺酸, 各组分别放入 5只蝌蚪.各三角瓶 分别用塑料膜封口, 使瓶内不留气泡, 然后倒置于盛 有水的盘子里, 观察各瓶中蝌蚪的死亡时间, 以探讨 牛磺酸对蝌蚪耐缺氧能力的影响.本实验重复

3 次. 将蝌蚪置于质量分数为

0 .

2 %的B- 丙氨酸自 来水溶液中处理

96 h 以耗竭蝌蚪本身内源的牛磺 酸, 对照组装满自来水并放入 5只未经处理的蝌蚪, 实验 1组装满自来水并放入 5只经

0 .

2 % 的B- 丙 氨酸自来水溶液处理的蝌蚪, 实验 2组装满

0 .

4 % 的牛磺酸自来水溶液并放入 5只未经处理的蝌蚪, 实验 3组装满

0 .

4 % 的牛磺酸自来水溶液并放入

5 只经

0 .

2 %的B- 丙氨酸自来水溶液处理的蝌蚪, 进 行密闭缺氧实验, 以探讨 B- 丙氨酸对蝌蚪耐缺氧 能力的影响.本实验重复 3次.

1 .

2 .

2 GABA 对蝌蚪耐缺氧能力的影响 用50 mL三角瓶, 对照组装满自来水, 实验组分别加入质 量分数为

0105 %、0 .

1 %、0 .

2 % 、0.

3 % 、0 .

4 % 、

015 %的GABA, 各组分别放入

5 只蝌蚪, 各三角瓶 分别用塑料膜封口, 使瓶内不留气泡, 然后倒置于盛 有水的盘子里, 观察各瓶中蝌蚪的死亡时间, 进行密 闭缺氧实验, 以探讨 GABA 对蝌蚪耐缺氧能力的影 响.本实验重复 3次.

1 .

2 .

3 p H 值对蝌蚪耐缺氧能力影响的实验 用50 mL三角瓶, 对照组装满 pH 值为 6.

7 的自来水, 实验组分别加入用盐酸调配的 p H 值为

5 .

4 、

5 .

8 、 612及用 N aOH 调配的 p H 值为

7 .

2 、

7 .

7 、

8 . 0的自 来水溶液, 各组三角瓶分别放入 5只蝌蚪, 进行密闭 缺氧实验, 以探讨水体不同 p H 值对蝌蚪耐缺氧能 力的影响.本实验重复 3次.

1 .

3 数据处理 观察数据均以x ? s表示, 组间差异采用方差分 析LSD法.表1~ 表 4中所列数据, 同一列数字右 侧小写字母相同者表示差异不显著 ( P >

0 . 05), 不 同者表示差异显著 (P <

0 . 05);

同一列数字右侧大 写字母相同者表示差异不显著 (P >

0 . 05), 不同者 表示差异极显著 (P <

0 . 01).

2 结果

2 .

1 实验观察 蝌蚪在密闭缺氧条件下, 起初游动正常, 随后渐 渐失去平衡, 游动减缓, 有的长时间停在水下, 偶尔 上下游动.一段时间后蝌蚪逐渐丧失游动能力, 仅 有口、 鳃不断开闭, 最后死亡.死亡时口和鳃盖张 开, 部分个体蜷缩.

2 .

2 牛磺酸对蝌蚪耐氧能力的影响 对体长 (

2 .

7 ?

0 . 1) cm、 体重 (

0 .

23 ?

0 . 01) g的 蝌蚪进行牛磺酸耐氧能力的影响实验结果如表 1所示.与对照组相比, 不同质量分数的牛磺酸水溶液 均可延长蝌蚪平均存活时间,