PDF《使用 说明书 使用说明书》

2、 标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解. 试剂 试剂 试剂 试剂准备 准备 准备 准备

1、 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25 ),试剂不能直接在

37 溶解.

2、 标准品(冻干品) :每瓶 标准品用标准品稀释液稀释至 1mL, 盖好后室温静置大约

10 分钟, 同时反复颠倒/搓动以助溶解, 其浓度为

20 ng/mL.准备

7 个稀释标准品的 EP 管,每个 EP 管中加入

500 的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成

20 ng/mL, 10ng/mL,5 ng/mL,2.5 ng/mL,1.25 ng/mL,0.625 ng/mL,0.312 ng/mL,标准品 稀释液(0 ng/mL)直接作为空白孔.为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标 准品溶液. Tube Tube Tube Tube

1 1

1 1

2 2

2 2

3 3

3 3

4 4

4 4

5 5

5 5

6 6

6 6

7 7

7 7

8 8

8 8 ng/mL ng/mL ng/mL ng/mL

20 20

20 20

10 10

10 10

5 5

5 5 2.5 2.5 2.5 2.5 1.25 1.25 1.25 1.25 0.625 0.625 0.625 0.625 0.312 0.312 0.312 0.312

0 0

0 0

3、 检测稀释液 A A A A 及检测稀释液 B B B B:用6mL 蒸馏水或去离子水将 6mL 浓检测液 A 及B稀释至 12mL,进行

2 倍稀释,稀释后的工作液不宜进行冷冻保存.

4、 检测溶液 A A A A 及检测溶液 B B B B:Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时 离心处理, 以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底. 临用前分别以检测稀释液 A A A A 或BBBB1:100 稀释(如:10 检测溶液 A /

990 检测稀释液 A) ,充分混匀,稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制(100 /孔) ,实际配制时应多配制 0.1-0.2mL.

5、 浓洗涤液:用580mL 蒸馏水或去离子水将 20mL 浓洗涤液稀释至 600mL,进行

30 倍稀释.

6、 底物溶液:请用灭菌的移液器吸头吸取所需体积的 TMB 至另一干净容器中使用,容 器中剩余的底物应予丢弃,不要倒回 TMB 瓶中. 注注注注意 意意意:

1、 标准品请于临用前

15 分钟内配制.该标准品只能使用一次.

2、 标准品的稀释不能直接在板中进行.

3、 标准品、检测溶液 A A A A 工作液、检测溶液 B B B B 工作液请使用相应的稀释液配制,不能混 淆.混匀时要轻轻充分混匀,避免起泡.为保证实验结果的准确请使用微量吸管,并 校准微量加液器.请依据所需的量精确配制,尽量不要微量配制(如吸取检测溶液 A A A A 时,一次不要小于

10 ) ,以避免造成浓度误差.

4、 请勿重复使用已经稀释过的标准品、检测溶液 A A A A 工作液和检测溶液 B B B B 工作液.

5、 浓洗涤液中如有结晶析出,请先温育至室温,轻轻混匀,至到结晶完全溶解再进行配 制. 操作步骤 操作步骤 操作步骤 操作步骤 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符 合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数.

1、 加样:分别设标准孔、待测样品孔、空白孔.设标准孔

7 孔,依次加入

100 不同 浓度的标准品(见试剂准备 2).空白孔加

100 (见试剂准备第二步最后一管) , 余孔加待测样品

100 ,酶标板加上覆膜,37 温育

2 小时.

2、 弃去液体,甩干,不用洗涤.

3、 每孔加检测溶液 A A A A 工作液

100 (临用前配制) ,酶标板加上覆膜,37 温育

1 小时 .

4、 弃去孔内液体,每孔用

400 的洗涤液洗涤,浸泡 1-2 分钟,甩干(也可轻拍将孔内 液体拍干) ,重复洗板

3 次.最后一次洗涤后,要把孔内的洗涤液完全甩干.