编辑: 被控制998 | 2018-11-28 |
2 个拷贝的 35S 启动子序列、pat 基因、35S 终止子序列组成,它们 由来自转化质粒pPvuI 酶切的反向片段连接. 5. 由孟德尔遗传分析可知,插入的 pat 基因以单一显性遗传.通过 Southern 印迹杂交分析和连续杂交分析证明了基因插入的稳定性. 6. 35S 启动子和终止子序列控制大豆 A2704-12 中pat 基因的表达. 35S 启动子 驱动高水平的组成型表达.A2704-12 大豆植株叶片中 PAT 蛋白含量的上限大约是 17.6 ? g/g 鲜重.根中 PAT 蛋白含量的上限大约是 3.69 ? g/g 鲜重. 7. 与常规对照品种 A2704 大豆的平行比较表明,两种作物的农艺性状无显著 差异.通过比较与作物品质和形态相关的参数,证实了两者的近似性,此外,转 基因大豆 A2704-12 已经通过常规的植物育种方法与其他大豆品系杂交,没有观察 到它们的农艺性状参数超出农业生产中大豆植物的常规数值范围. 8. 证明了由转基因大豆 A2704-12 加工的食品与其非转基因对照加工的食品的 实质等同性.分析的样品取自美国和加拿大多个地区的多个田间试验点.将转基 因大豆A2704-12及其受体品系 A2704 大豆应用同样的常规农业耕作措施进行种植, 只是一半的转基因的大豆 A2704-12 植株喷施了 Liberty? 除草剂(活性成分为草铵 膦) .比较转基因大豆和非转基因大豆的主要营养成分,证实了两者等同.与对应 的常规大豆品种 A2704 相比,转基因大豆 A2704-12 中已知的大豆抗营养因子(水 苏糖、棉子糖、植酸、胰蛋白酶抑制剂、植物凝集素)没有显著差异,只是转基 -
4 - 因大豆 A2704-12 中植物凝集素含量偏低. 转基因大豆 A2704-12 和常规大豆 A2704 中植物凝集素的含量比文献报道的范围低得多.未观察到潜在的抗营养效应或毒 理学问题. 9. 对PAT 蛋白性质进行的检测没有发现安全性方面的问题.食品和饲料中存 在的 PAT 蛋白不会带来潜在的风险.对该酶的性质研究深入,PAT 蛋白表现出对 除草剂草铵膦具有高度的底物特异性. 该蛋白在模拟胃液中快速降解. PAT 蛋白与 已知的过敏原和毒素不具有序列同源性,且在消化环境中不稳定.在另外一项研 究中,给雌性和雄性小鼠饲喂纯化的 PAT 蛋白,经过
14 天后,未观察到与处理相 关的负面影响. 10. 未发现与新蛋白(PAT 蛋白)或者人类膳食中的大豆已知的作用相关的安 全问题. 转pat 基因抗除草剂草铵膦大豆 A2704-12 于1996 年获得了 USDA 的批准,
1998 年获得了 FDA 的批准.转基因大豆 A2704-12 已经获得批准的国家和地区 还有:澳大利亚/新西兰、阿根廷、南非、俄罗斯、日本和墨西哥. -
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三、工作目的和意义 通过转入抗除草剂基因, 拜耳作物科学公司已经开发出了一种具有重要经济 价值的大豆品种,它对 PPT (phosphinothrin)除草剂草铵膦具有抗性.这一成果是 通过分离绿棕褐链酶菌(Streptomyces viridochromogenes)中的 pat 基因而取得 的. pat 基因产物是草铵膦乙酰基转移酶(PAT=phospinothrin acetyl-transferase), 它是一种使 PPT 乙酰化的修饰酶.通过对除草剂活性成分草铵膦的游离铵基进 行乙酰化,PAT........