PDF《中国实验动物学会》

7 液降至室温后,PBS 洗3次,随后按选好的免疫组织化学的染色方法进行染色. 6.2 高压抗原修复法:切片放入抗原修复液中,边同容器放入高压锅中加热至沸腾.盖上压力阀 至喷汽后持续

3 分钟, 待修复液恢复至室温后, PBS 洗3次, 随后按选好的免疫组织化学染色方 法进行染色. 6.3 水浴抗原修复法:切片放入 0.01M 柠檬酸盐缓冲液(PH0.6)中,边同容器一起放入水溶锅 中加热,其间应不断用温度计测其温度,待抗原修复液的温度达到有效温度后(92℃↑).即 开始计时,持续

40 分钟.待抗原修复液恢复至室温后,PBS 洗3次,随后按选定好的免疫组化 染色方法进行染色. 6.4 煮沸抗原修复法: 将切片放入抗原修复液中于电炉上加热, 不时用温度计测量温度, 当达 92℃ 后,即可拔离电源,当温度低于 92℃时,再插上电源,如此反复持续至

10 分钟左右.待抗原修 复液降至室温后,PBS 洗3次,随后按选定的免疫组化染色方法进行染色.

7 结果判定 7.1 阴性对照为阴性时,阳性反应产物呈淡黄色、棕黄色和褐黄色粗颗粒. 淡黄色、棕黄色和褐黄色粗颗粒. 7.2 依照细胞阳性着色程度(抗原含量),可分为弱阳性(+)1 分;

中等阳性(++)2 分;

强阳性(+++)3 分.依照阳性细胞数量,可分为:弱阳性(+ ,指阳性细胞总数在 25%以下);

中等阳性(++,指阳性细胞总数在 25%―49%);

强阳性(+++ ,指阳性细胞总数在 50% 以上). 7.3 7.3 对于 对于免疫组织化学后切片的评判,要做到准确、客观,必须具备容易分辨出主要细胞阳性, 阳性细胞的阳性物定位要准确,不能模棱两可,是是而非.每批检测的切片,都须设阴性或空 白对照片,以确保检测病例的准确性和可靠性.对于具有明确检测抗原,可以利用自身设立阳 性对照片.

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(六)主要试验的分析、综述报告,技术经济论证,预期的经济效果;

(七)采用国际标准和国外先进标准的程度,以及与国际、国外同类标准水平的对 比情况,或与测试的国外样品、样机的有关数据对比情况 目前,由于动物实验本身的原因和实验动物种属的不同,抗体生产公司生产标 准也各不相同,实验动物组织病理学在实验动物组织病理学免疫组织化学技术方面 迄今无国家层面的相关标准,本标准的制定以符合《实验动物管理条例》为前提, 在编制体例上尽可能与实验动物相关国家标准一致.

(八)有关的现行法律、法规和强制性标准的关系 《实验动物管理条例》、《实验动物质量管理办法》等法规条文跟本标准内容 无关联. 《实验动物 微生物等级及监测》、《实验动物 环境设施》等实验动物强制性 标准跟本标准内容无关联. 《关于善待实验动物的指导性意见》中的有关条款与本标准内容无冲突.

(九)重大分歧意见的处理经过和依据 无

(十)标准作为强制性标准或推荐性标准的建议;

鉴于本标准为团体标准,建议作为推荐性标准. (十一) 贯彻标准的要求和措施建议 (包括组织措施、 技术措施、 过渡办法等内容) ;

本标准发布实施后,建议积极开展宣传普及标准内容 (十二)废止现行有关标准的建议;

本标准跟现行标准无冲突,不必废止现行标准.

9 (十三)其它应予说明的事项. 无. 参考文献 白桂芹等, 陈旧石蜡组织块的免疫组织化学染色及防脱片体会. 重庆医学, 2015(23): 第3250-3252 页. 陈劲龙与冉丕鑫, 一种改良的免疫组织化学染色方法. 广州医学院学报, 2003(01): 第69-71 页. 杜宇, 赵莹与李寒松, 免疫组织化学染色中抗原修复方法的比较研究. 中国刑警学 院学报, 2005(01): 第58-59 页. 何新明等, 免疫组织化学染色技术常见问题的研究与探讨. 中国免疫学杂志, 2011(S1): 第1188-1190+1194 页. 黄照权等, 免疫组织化学染色法――LSAB 法的改进及其应用. 实用医技杂志, 1995(06): 第461-462 页. 李明华与史鹏飞, 甲醛固定与微波固定在消化道内分泌细胞免疫组织化学染色中的 比较. 中国继续医学教育, 2016(02): 林晓芸, 吴钦穗与杨聪玉, 一种新型脱蜡抗原修复液在免疫组织化学染色中的应用. 福建医药杂志, 2008(05): 第90-91 孟群, 免疫组织化学染色要求及注意事项. 肿瘤学杂志, 2011(03): 第239-240页. 申洪与陆药丹, 免疫组织化学染色的定量方法研究. 生物医学工程学杂志, 1993(04): 第281-284 页.