PDF《The world leader in serving science》

Rev.

2017GSP05 The world leader in serving science Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪 简明中文手册 第二部分:相对定量 英潍捷基(上海)贸易有限公司 赛默飞世尔科技公司 简明中文操作指南

2 Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪1. 双击桌面图标 ,开启SDS software或从Start > All Programs > Applied Biosystems > SDS 2.4 > SDS 2.4开启软件. 2. 进入SDS software后出现Login窗口,输入用户名和密码,或以administrator登入 (无须密码) ,按OK进入软件. 3. 点选 ,或从"File"下选择"New" ,出现如下窗口: Assay:选择 Ct(RQ) Container: 根据反应板类型,选择96-well Plate,384-well Plate或384-well Taqman Low Density Array Template:Blank Template(如有之前已设好的Template,点击Browse可导入模 板) . Barcode:可使用扫瞄器记录样品板条形码,如果没有条码此项留空. 3.1 点击OK,即出现Plate Document.①在Setup 窗口下点"Add Detector"即会弹出 简明中文操作指南

3 Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪Detector Manager,②如有已设定的Detectors,选中待检测的Detector,③点击 Copy to Plate Document,④点击Done完成添加. 3.2 设定新的Detector: ① 在Detector Manager中点击"New", ② 进入"Add Detector"窗口设置Detector,③点击"OK"完成detector设置. Name:输入基因名称. Reporter:选择所使用的报告荧光. Quencher:如果使用MGB探针或SYBR染料则选None Fluorescent.如探针淬灭基 团为TAMRA则选择TAMRA. 3.3 设置反应板:①选中放置样品的反应孔,②标记"Use" , ③输入样本名称,④在"Task"栏中选择属性:目的基因"Target" ,内参"Endogenous Control" . 4. 设置PCR反应条件: 简明中文操作指南

4 Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪 ①进入"instrument"下的"Thermal Cycler"窗口以设定反应条件,②请依所使用 的试剂和加热模块选择Fast、Standard 或9600 Emulation mode,并设定实际反应 体积,③设定PCR 条件. 5. 设定完成后,保存Plate Document:File 下点选Save As后输入文件名称,保存类 型为SDS 7900HT Document(*.sds) 6. 点"Instrument"下的"Real-Time"窗口,按"Connect to Instrument" ,再按 "Open/Close"键弹出样品槽. 6.1 将样品盘置入,方向如下: 6.2 按"Start Run"开始运行. 简明中文操作指南

5 Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪7. 分析相对定量结果:开启 RQ Manager 1.2 software 或从 Start > All Programs > Applied Biosystems > SDS 2.4 > RQ Manager 1.2 开启软件. 7.1 输入用户名和密码,点击OK登入(初始用户名:administrator;

密码为空) . 7.2 点击 或从"File"下选择"New Study From SDS File"后,会出现New Study的窗 口,在Container Type中选择对应的反应板类型,并键入Study名称.点击"Add Plates" ,将要分析的结果加入Study 中. 简明中文操作指南

6 Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪8. RQ Manager软件即开启一个新的RQ Study: 8.1 按屏幕上绿色分析按钮 进行分析,分析完成后选择Amplification或者Gene Expression窗口观察结果. 8.2 在Amplification Plot窗口中,点选Detector观察每个基因的扩增曲线. 8.3 在Gene Expression窗口中,点选Detector观察每个基因的相对表达量. 简明中文操作指南

7 Applied Biosystems? 7900HT 实时定量 PCR 仪8.4 Table Orientation:选择观察方式,分为Detector Centric,Sample Centric和Plate Centric三种方式. 8.5 Calibrator:选择对照组. 8.6 Graph Orientation:选择X轴表达类型,分为Detectors 和Samples 二种. 9. 分析完成后,点File > Save Study As 将study储存成(*.sdm),输入Study 名称,然 后按下Save. 9.1 可点击File > Export > Result Data,将Result Table保存为txt文件. 9.2 在图形上点击右键,选择Save Plot to Image File,保存为JEPG 图片. 简明中文操作指南