PDF《微型月季的组培快繁技术》

0 m i n , 可使 消毒 效 果达到 最佳 .

2 初代 培养 初代培养 是植物 组织培 养 的基 础,其目的是建立 无菌 系, 获得无菌材料 , 并使外植体进一步发育.微型月季初 代培养中腋芽的萌发受消毒方式、 外植体采集时期 、 培养 条件 、 培养基 成分 、 激素 等多个 因素 的影 响.2.1初代培养基 微 型月季初代 培养 的培养 基一 般采 用为6一B A

2 m g / L+N A A

0 .

3 m g / L+培养 基MS , 其腋 芽启 动 率可 达80%以上 .

2 .

2 接种 采集微 型月季带 饱 满腋 芽 的茎 段,用流水冲洗30min,去除泥垢, 再用洗涤液浸

2 0~

3 0 m i n , 用软刷轻 轻刷洗, 流水 冲洗

3 0 r a i n后,将枝条切 成 带腋 芽 的约

1 . O c m茎段 , 在超 净工作 台上将外 植体放 入75%酒 精 中消 毒20~3

0 s , 然后转入10%的次氯酸钠 溶液中消毒15~

2 0 mi n , 再用 无菌水 冲洗 3― 5次 .将带 腋芽的茎段接 入消作者简介: 宗树斌(

1 9

8 2一) , 山东 巨野人 , 讲师 , 硕士 , 研究方向 : 园林植物与观赏园艺 . 收稿 日期 :

2 0

1 0―

0 5一l

7 1 6卷13期 宗树斌 微型月季 的组培快繁技术

7 5 毒后 的初 代培养 基上 .

2 .

3 培 养条 件接种后先暗处 理2d,然后转入1600~

2 0

0 0

1 x光 强下 培养 , 光照16h/d,温度22±2 ℃ . 微 型月 季腋 芽接种 后20d左 右 即可观 察到叶片展 开,但是 顶芽并 未开 始发 育,茎也未见 伸长,这只是 芽 中原 来 未发 育成熟 的叶片在 适宜的条 件下吸收营养后 单纯的生长.若 条件 不适 宜顶芽 萌发 , 待顶芽 长 到一定 程 度后 便停 止生 长,甚至 顶芽坏 死,所以叶片 的展 开并 不意味着微型月季芽 的启 动,植株再 生 .大 约再经 过7d后 , 顶 芽开 始发育,长出新 叶,才是启动 的标 志.3继代培 养 在初代 培养 的基础 上,获得的 芽、苗数 量有 限,需经继代培养 以获 得大 量 的无 菌苗材料.继 代 培养 试验材料为初代 培养获 得 的无菌 苗.3.1继代 培养基 微 型月 季继代 增殖 倍数和增 殖效 率主要与培 养基的激 素浓度及配比,培养基的含糖量和pH有关 . 在 继代 培养 中,关键是 掌握 细胞 分裂 素和 细胞 生 长素 的适宜 浓度 及配 比,低浓度 细胞 分裂 素有 利于 不定 芽 的增 值,浓度过 高则 抑制 不定 芽增殖,生长素 对不定芽的增 值 率影 响不显 著,适量的生 长素有利于芽的高 生长和叶生 长 .实 验证明增 殖培养中BA浓度以0.5~1 .

5 mg / L为好,超过2.0mg / L时抑制 增殖 .K T的效 果不 如BA好 , 且 随着 K T浓度的增大 愈伤组织明显产 生.N A A 和IAA对 增 殖均 有一定的抑制作用,但有利于丛生芽的高生长,IAA的效果 比NAA好 , 浓度以0.2mg/L为好 . 影 响继代 增殖 倍数 的另 一个因素是 培养基中糖 的用 量和pH值 的高低 , 适 当提 高糖 的浓 度,降低 p H, 对苗 的分 化 及幼 苗 的生 长有 较 大促 进作用.一般 糖量加大 , p H 值 降低可 以提 高分 化率

2 0 % , 同时 缩 短继 代 周期 , 缩短5~

1 0 d , 但糖的用 量不可超 过50g/L,pH值 不可低于5.5,否则会出现大量 小芽 丛和 玻璃 化苗 . 因此 , 微型 月季继 代培 养 的最 适 培养 基配方为 : MS+ B A1 .

0 m g / L+I A A

0 .

2 mg / L糖4OL,琼脂

6 g / L , p H值5.8~6.0.

3 .

2 继 代培 养次数 在 进行 微型 月季组 培快繁工 厂化 生产中,掌握进 行继 代培 养 的次 数 十分 重要,它直接 关系到进行 组培 苗生产 的计 划安排、全年 的产 量、及组 培苗的生 根生 长情况 及 变异率 . 试验结 果表 明,随着继代次数 的增 加,微型月 季继代增殖系 数呈先上 升后下降的趋 势,在第三代 可达6.6, 随后出现 降低 .试验中还 发现,随着继 代次数的增加,变异苗出现 增多 , 使用同一 继代 培养基连续 继代多次,其变异率提高 .组培 快繁 工厂 化生产 中最适 的继 代次 数为4~5 次,应根据 生产 季节 和需苗 量来进 行安 排生 产.4生根培 养组培苗 的生根 是非 常重要 的环 节,根生 长 的好坏 直接影响过度 苗 的成 活率 .