PDF《如何用 ImageJ 进行 WB 定量？》

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sinogenesci.com E-mail: [email protected] 信诺金达-专业服务! 如何用 ImageJ 进行 WB 定量? WB 是研究蛋白表达的一个经典方法. 对于一些时间点或者是不同组织蛋白 表达量的分析,就涉及到量的变化.一些凝胶成像软件带有此分析工具,比如 Bio-Rad, Kodak, Li-cor 等公司的成像系统.除了这些软件,还有一个比较 简单的图像处理软件 ImageJ 可以很方便的进行灰度分析.ImageJ 主页是 http://rsb.info.nih.gov/ij/index.html,更多资料可以访问.这里只是简单 介绍一种灰度分析的方法. 很容易就能从主页下载并安装 ImageJ,从下面简单的几步操作就能完成 WB 定量分析. 1. 打开文件;

2. 把图片转化成灰度图片:Image>Type 选8-bit;

3. 消除背景影响:Process>Subtract Background. 选择

50 基本可以. 4. 设置定量参数: Analyze>Set Measurements, 点击面积,平均密度,和 灰度值及 Integrated Density;

5. 设置单位 Analyze>Set Scale,在"Unit of length" 边的方框里输入 "pixels";

6. 把图片转换成亮带,Edit>Invert ;

电话:010-82421559 传真:010-62419956 http://www.sinogenesci.com E-mail: [email protected] 信诺金达-专业服务! 7. 选择 Freehand Selection;

尽量把条带圈起来;

点击键盘 m, 出来 IntDen 灰度值;

10. 用"Freehand Selection"选择下一条带,按m进行测量. 11. 当测定完所有条带,选结果中的"Edit "的"Select All" ,然后复制数据 "IntDen"到Excel 表即可进行分析.

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