编辑: lqwzrs | 2019-07-08 |
1 产品介绍.1 产品特性.1 产品应用领域.1 处理原则.2 OriCell 人脐带间质干细胞的复苏和培养.2 OriCell 人脐带间质干细胞的传代.4 OriCell 人脐带间质干细胞的冻存.6 参考文献.6 CBPI0349A8 HUXUC-01001 Page
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7 产品基本信息 产品名称 人脐带间质干细胞 货号HUXUC-01001 规格1*106 个细胞/管 冻存代次 P2 保存条件 液氮 警告:产品冻存液中含有DMSO,具有潜在的生物公害,操作者请谨慎处理. 产品介绍 脐带间充质干细胞是一种能分化成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的多能干细胞. 其具有强大的增殖能力,且参与构成造血微环境,因此被广泛应用于组织工程,细胞 治疗和基因治疗. OriCell人脐带间质干细胞取自健康足月分娩孕妇的脐带,其拥有强大的自我更新 能力并具有多向分化潜能. 质量控制: ? 本产品经过了细菌/真菌,支原体,内毒素检测. ? 本产品还经过细胞复苏活力检测,细胞周期,分化潜能鉴定. 该产品仅提供给进一步科研使用,不可应用于临床治疗等其他方面. 产品特性 ? 操作规范的条件下,本产品有良好的传代能力,至少能传5代. ? 本产品有良好的分化潜能,能分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等. 产品应用领域 目前,人脐带间质干细胞作为一个研究热点被广泛应用于再生医学和组织工程 (特别是在骨、心血管和神经系统等疾病的领域). CBPI0349A8 HUXUC-01001 Page
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7 OriCell人脐带间质干细胞可作为细胞模型被应用于增殖,移植和分化研究,以及 体内外的免疫反应的鉴定. 处理原则 1. 要在无菌的条件下处理该产品. 2. 人脐带间质干细胞一旦培养起来,请冻存一部分细胞作为备份. 注意:人脐带间质干细胞能被冻存或复苏至少一次. 3. 我们强烈建议用于科研的细胞代次不超过10代. 4. 我们建议细胞的接种密度为 2.5-4.0*104 cells/cm2 ,具体数量请根据细胞状态加以 调整. 注意:我们强烈建议使用OriCell培养基和其他相关试剂以达到最理想的培养效果. OriCell 人脐带间质干细胞的复苏和培养 所需试剂 ? OriCell 人脐带间质干细胞完全培养基(货号:HUXUC-90011) 人脐带间质干细胞的复苏和培养 1. 准备好37℃水浴. 2. 准备好人脐带间质干细胞完全培养基,温育到37℃. 3. 在15 mL离心管中加入9 mL的人脐带间质干细胞完全培养基. 4. 从液氮罐中取出冻存的人脐带间质干细胞,立即放入-80℃冰箱(目的是让进入冻 存管的液氮稍加挥发). 5. 在-80℃放置2-3 min后,取出冻存细胞,将冻存管迅速放入37℃温水中,快速晃 动使管中内含物尽快融化.仔细观察,待冻存管内含物完全融化后取出. 注意:
1 尽可能避免水没过管帽,以减少污染的风险.
2 要快速完成细胞复苏过程,融化过程时间过长,会造成复苏后的细胞活性较差. 6. 用70%-75%酒精消毒冻存管口的外壁. 7. 在超净台中打开冻存管,用吸管将细胞冻存悬液移入装有9 mL完全培养基的15 mL离心管中.在这一过程请尽可能避免产生气泡. CBPI0349A8 HUXUC-01001 Page
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7 8. 为了减少细胞损失,往冻存管中加入1 mL完全培养基,稍微吹打,用吸管将这1 mL的细胞悬液吸入离心管中,再用吸管将离心管中的细胞轻轻吹打混匀. 9. 将细胞悬液经250 g(对应于Eppendorf 5810R离心机是1134 rpm)离心5 min. 10. 尽量去除上清液,向细胞沉淀物加入1-2 mL的完全培养基(已预热到37℃),轻 轻吹打均匀. 11. 将细胞全部接种到1个T25培养瓶或底面积相当的培养器皿中,加入足量的完全培 养基.轻轻摇晃细胞培养器皿,使细胞均匀分布. 12. 放入37℃、5%CO