PDF《王伦功能性 CdS 纳米荧光探针荧光 增敏法测定人血清白蛋白...》

[研究简报] 功能性 CdS 纳米荧光探针荧光 增敏法测定人血清白蛋白 汪乐余, 周运友, 朱昌青, 张明翠, 陶海升, 王伦(安徽师范大学化学与材料科学学院, 芜湖 241000) 关键词 CdS 纳米粒子;

荧光探针;

人血清白蛋白 中图分类号 O

614 文献标识码 A 文章编号

025120790 (2003)

0420612203 收稿日期: 2001211219.

基金项目: 国家教育部高等学校骨干教师资助项目(批准号: 99JL 079) 资助. 联系人简介: 王伦(1964 年出生) , 男, 硕士, 教授, 从事光谱分析研究. E2 m ail: w angly73@yahoo. com 目前, 以荧光分析法对蛋白质进行研究主要采用有机荧光探针[1 ~

3 ] . 与传统的有机染料 (如罗丹 明) 探针相比, 半导体纳米晶体探针的光强度要高

20 倍, 光稳定性要高

100 倍, 谱线宽度只是有机染 料谱线宽度的

1 3[4 ] . 将半导体纳米晶体作为探针用于测定生物分子, 将大大提高分析的灵敏度和选 择性, 而目前其应用于生物染色、医疗诊断、 DNA 序列测定和免疫分析等方面的研究很少[4,

5 ] . 本文 合成了胶态纳米粒子 CdS, 并在其外表面修饰一层巯基乙酸, 使其具有水溶性, 并能与生物分子作用, 从而可利用其外表面的功能性基团对人血清白蛋白进行测定 .

1 实验部分 1.

1 仪器与试剂 H itachi F24500 型荧光分光光度计(日本);

78HW

21 型恒温电磁搅拌器(江苏金坛 市医疗仪器厂);

pHS23C 型酸度计(上海大中分析仪器厂) , H itachi H

2600 型透射电子显微镜(日本) , 纳米溶胶的合成装置 (自组装). Cd (C lO 4)

2 溶液 (011 mo l L , A lfa) , 六偏磷酸钠溶液 (011 mo l L , R iedel de Haen) , N aOH 溶液 (011 mo l L ) 和巯基乙酸溶液 (上海化学试剂公司). 人血清白蛋白 (HSA ) 和Χ2球蛋白(Χ 2G) 储备液(100 Λg mL , 上海生化试剂公司): 将人血清白蛋白或 Χ 2球蛋白溶解 于质量分数为 015% N aC l 溶液中, 并于

0 ~

4 ℃保存, 人血清样品由芜湖市第二人民医院提供 . 所用 试剂均为分析纯, 水为二次蒸馏水 . 1.

2 实验方法 CdS 标准溶胶的制备参考文献[6 ]方法 . 在2L的三颈烧瓶中注入

2 L 水, 通氮气

20 m in, 再加入

4 mL

011 mo l L Cd (C lO 4)

2 溶液, 然后加入

4 mL

011 mo l L 六偏磷酸钠溶液作为稳定剂. 用011 mo l L N aOH 溶液调节pH 值至 914. 在剧烈搅拌下, 通入 9mL H 2S, 在10 m in 内, 溶液的pH 值逐渐 降为 412. 再以

011 mo l L N aOH 溶液调节 pH 值至中性, 将产生的黄色溶胶用氮气冲洗

015 h. 用巯基乙酸[4,

7 ] 与CdS 纳米粒子反应, 在其外修饰一层有机化合物 . 借助于其外端的―COOH , 使 得该纳米粒子具有良好的水溶性, 并能与生物大分子结合, 从而达到测定生物大分子的目的 .

2 结果与讨论 2.

1 纳米粒子的电镜分析 图1(A ) 和(B ) 分别为 CdS 无机纳米溶胶和 CdS2SCH 2COOH 纳米溶胶的 TEM 图.可见, CdS 纳米溶胶粒子的粒径约为

7 nm , 而功能性 CdS 纳米粒子的粒径约为

12 nm. 2.

2 纳米溶胶的荧光光谱 在pH ≤710 时, CdS 纳米溶胶的荧光很弱, 随着pH 值的增加, 其荧光逐 渐增强, 约在pH =

1115 时达到最大值 . 此外, 在原CdS 溶胶中加入 1*10-

3 mo l L Cd 2+ , 其荧光明显 增强[6,

8 ] . 图2(A ) 谱线 b 为CdS 纳米溶胶的荧光光谱, 可见, 在Κex=

360 nm 时, 谱峰位于

480 nm , 与 文献[3 ]结果相符 . 文献[5,