编辑: 戴静菡 | 2015-04-03 |
必要时,选择不同的色谱条件或用气相色谱-质谱法确证.如果内标物色谱峰正常,而无乙醇的色谱峰时,可认为检验结果为阴性.乙醇对照品和内标气相色谱图,参见附录A. 定量测定 本方法采用内标法-校准曲线法或内标法-单点校正法定量测定. 6.2.3.1 内标法-校准曲线法 采用内标-校准曲线法测定(见附录B).将乙醇对照品溶液进样,以乙醇和内标峰面积比为纵坐标,乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线,用标准曲线对待测样品进行定量,所测样品中乙醇的浓度值应在线性范围内. 6.2.3.2 内标法-单点校正法 待测血液样品乙醇浓度在标准溶液浓度的±30%内可用单点法定量. 平行试验 按以上步骤对同一待测样品进行平行试验. 单柱单检测器两份样品测定结果按两份样品的平均值计算,双样相对相差不得超过10%(有凝血块的血样不超过15%).双样相对相差按式(1)计算: | C1 - C2| 双样相对相差(100 1) (C 式中: C
1、C2((两份样品平行定量测定的结果;
(C ((两份样品平行定量测定结果的平均值(C1+C2)/2. 双柱双检测器两份样品测定结果的相对标准偏差RSD(%)若不超过5%时(有凝血块的血样不超过10%),结果按两份样品结果的平均值计算. 结果计算 血液中乙醇浓度测定采用内标法-校准曲线法定量或按式(2)计算: A( Ai′(c C 2) A′(Ai 式中: C((血液样品中乙醇浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);
A((血液样品中乙醇的峰面积;
A′((标准溶液中乙醇的峰面积;
Ai′((标准溶液中内标物的峰面积;
Ai((血液样品中内标物的峰面积;
c((标准溶液中乙醇浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL). (资料性附录) 乙醇对照品和内标气相色谱图 A.1 按色谱柱(1)条件得乙醇对照品和内标气相色谱图,见图A.1. 图A.1 按色谱柱(1)条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图 A.2 按色谱柱(2)条件得乙醇对照品和内标气相色谱图,见图A.2. 图A.2 按色谱柱(2)条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图 (资料性附录) 校准曲线 配制乙醇浓度为0.
10、0.
20、0.
50、0.
80、1.
00、2.
00、3.00mg/mL的水溶液,按6.1和6.2项下分析,每一浓度点取2份,以乙醇与内标叔丁醇的峰面积比对乙醇浓度做标准曲线. 按色谱柱(1)条件测得的标准曲线方程为 X = 1.0761 C - 0.0162(r = 0.9997),按色谱柱(2)条件测得的标准曲线方程为 X = 1.0655 C - 0.0177(r = 0.9997).式中X为乙醇与叔丁醇的峰面积比值,C为乙醇工作溶液浓度(mg/mL).