DOC《附件2（略）》

附件2(略) 附件3 猪伪狂犬病毒gE糖蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒等 5种兽药产品说明书和标签

一、猪伪狂犬病毒gE糖蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒说明书和标签

(一)猪伪狂犬病毒gE糖蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒说明书 兽用 【兽药名称】 通用名 猪伪狂犬病毒gE糖蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒 商品名 无 英文名 Blocking ELISA Test Technique for the Detection of Specific Antibodies of the gE Glycoprotein of the Aujeszky'

s Disease Virus in Pig Serum 汉语拼音Zhuweikuangquanbingdu gE Tangdanbai Zuduan ELISA Kangti Jianceshijihe 【性状】 (1)抗原包被板 表面光洁、无裂纹、无异物,96孔/块,5块/盒.

(2)阳性对照血清 淡黄色澄清溶液,无臭、无味、无沉淀物,装量2ml/管,1管/盒. (3)阴性对照血清 淡黄色澄清溶液,无臭、无味、无沉淀物,装量2ml/管,1管/盒. (4)结合物溶液 淡红色澄清溶液,无臭、无味、无沉淀物,装量60ml/瓶,1瓶/盒. (5)底物溶液 无色或淡黄色澄清溶液,无沉淀物,装量60ml/瓶,1瓶/盒. (6)样品稀释液 无色澄清溶液,无臭、无味、无沉淀物,装量50ml/瓶,1瓶/盒. (7)10倍浓缩洗涤液 无色澄清溶液,无臭、无味、无沉淀物,装量100ml/瓶,2瓶/盒. (8)终止液 无色澄清溶液,无沉淀物,装量60ml/瓶,1瓶/盒. 【作用与用途】 用于检测猪伪狂犬病病毒gE糖蛋白抗体. 【用法与判定】

1 用法 1.1 洗涤液配制:使用前将10倍浓缩洗涤液恢复至室温(20~25 ℃),并摇动使沉淀溶解(最好在28~37℃水浴中加热10~15分钟).然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释(如需配200ml的洗涤液,取20ml的10倍浓缩液加入到180ml的蒸馏水或去离子水中),混匀.稀释好的洗涤液在2~8℃条件下可保存3天. 1.2 血清稀释:待检血清和对照血清在抗原包被板上进行1:2稀释(如先在抗原包被板中加入50μl样品稀释液,再加入50μl待检血清或对照血清). 1.3 洗板程序:推荐使用自动洗板机.如果采用人工洗板方式,每次洗涤需遵循以下步骤:(a)倒置反应板弃去孔中液体;

(b)每孔加入300μl洗涤液;

(c)充分振摇洗涤板孔;

(d)倒置反应板弃去孔中液体.最后一次洗涤时可将洗涤液保留在孔中,直到下一步骤需添加的试剂配制完成再弃去. 1.4 操作步骤 1.4.1取出抗原包被板,在相应孔分别加入稀释好的待检血清和对照血清各100μl.阴性对照和阳性对照各设2孔.(按照1.2直接在抗原包被板孔上稀释待检血清和对照血清). 1.4.2 用封板膜密封抗原包被板,可选择以下两种方式之一进行孵育:(a)36~38℃下孵育1小时;

(b)2~8℃下孵育15~24小时. 1.4.3 揭去封板膜,按1.3洗板3次,倒置反应板弃去洗涤液,在吸水纸上拍干. 1.4.4 每孔加入结合物溶液100μl. 1.4.5 用封板膜密封抗原包被板,36~38℃下孵育30分钟. 1.4.6 揭去封板膜,洗涤3次,方法同1.4.3. 1.4.7 每孔加入底物溶液100μl,轻轻摇晃抗原包被板混匀2秒种. 1.4.8 室温(20~25℃)下避光显色15分钟. 1.4.9 每孔加入终止液100μl,轻轻敲弹抗原包被板的边缘混匀,15分钟内测定结果(测定前用软布擦拭板底部清除灰尘,确保板面的清洁.酶标仪空气调零,读值).

2 判定 在酶标仪上测定各孔OD450nm值.试验成立的条件是:阴性对照孔OD450nm算术平均值与阳性对照孔OD450nm算术平均值差异应大于0.6;

且阳性对照孔的抑制百分数(IN%)应大于60. 应用下列公式分别计算阳性对照孔和样品孔的抑制百分数(IN%): IN% = 阴性对照孔OD450nm算术平均值 C 阳性对照孔OD450nm算术平均值 *100 阴性对照孔OD450nm算术平均值 IN% = 阴性对照孔OD450nm算术平均值 C 样品孔OD450nm *100 阴性对照孔OD450nm算术平均值 如果样品孔的IN%小于40.0,则判为阴性;