DOC《大鼠纤维蛋白肽A(FPA)试剂盒（ELISA）》

2400、

1200、

600、

300、

150、0 ng/mL 2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可.当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验. 注意事项 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果.所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃.使用后立即冷藏保存试剂. 洗板不正确可以导致不准确的结果.在加入底物前确保尽量吸干孔内液体.温育过程中不要让微孔干燥掉. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果. 在储存和温育时避免强光直接照射. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体.任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性. 不能使用过期产品. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置. 试剂准备 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用. 20*洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20*洗涤缓冲液加19份蒸馏水. 操作步骤 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

样本孔中加入待测样本50μL;

空白孔不加. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板). 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值. 实验结果计算 以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度. 试剂盒性能 检测范围:75 ng/mL C

2400 ng/mL. 灵敏度:最低检测浓度小于10 ng/mL. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% . 说明 1. 由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险. 2. 最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份. 3. 不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考. 4. 只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品.只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到最佳的检测结果. 问题解答 若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题.同时您也可以参考以下资料: 问题 可能原因 解决方案 标准曲线差 吸取及洗涤不充分 充分的吸取及洗涤 移液不精确 检查和校正移液器 精密度低 洗涤不充分 按说明书要求充分洗涤和浸泡 混匀不充分和吸取试剂不足 充分混匀和吸取试剂 重复利用吸头、容器和覆膜 使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜 加样不精确 检查和校正移液器 O.D值低 每孔加的试剂量不精确 校正移液器,精确加入试剂 温育时间不正确 保证充足的温育时间 温育温度不正确 试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度 酶标记物或底物失效 通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查 没有加入终止液 按照说明书实验操作步骤加入终止液 超出读数时间读数 在说明书推荐的读数时间内读数 样本值 不正确的样本储存方式 正确储存样本,使用新鲜样本进行实验 不正确的样本收集和处理方法 采取正确的样本收集和处理方法 待测物质在样本中含量低 使用新鲜样本,重复实验