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多年来随着疫苗在预防其他疾病方面取得的巨大成功,使得利用疫苗来防治奶牛乳房炎成了一个全球性的研究热点. 1.2 引起奶牛乳房炎的因素较多,不同地区的发病情况也不一样,但总结起来引起奶牛乳房炎的主要因素为:饲养因素、奶牛自身因素和病原微生物等. 1.2.1 饲养因素 饲养因素包括:饲养者对奶牛乳房炎的重视程度,奶牛的营养水平以及环境因素.对 奶牛乳房炎的重视程度表现在免疫治疗、挤奶设备或人工榨乳、牛舍的设计、垫料的使用等多个方面.我国多数养殖场和散户忽视了对奶牛乳房炎的免疫以及对隐形奶牛乳房炎的防治,直到发展成为临床型奶牛乳房炎才开始治疗.同时挤奶设备或人工榨乳也很容易诱发乳房炎的交叉感染.不科学的牛舍设计以及不适时地更换垫料会造成奶牛生活环境较差,容易滋生各种病原菌,从而大大增加了奶牛的感染几率.饲料的成分及比例不合适也会增加奶牛乳房炎的发病率.饲料中过量的蛋白质或氮类会促使乳房炎发病.奶牛最适宜的生活环境温度为15~22℃(适宜生活温度为5~28℃),因此环境中温度和湿度过高容易诱发奶牛乳房炎.据报道,乳房炎发病具有明显的季节性,夏季高温潮湿,乳房炎的感染率最高,而春秋季凉爽则发病率次之,冬季寒冷不利细菌繁殖则发病率最低.同时奶牛乳房炎具有地域性,南方地区乳房炎的发病率明显高于北方地区.

2 材料与方法 2.1 材料 2.1.1菌株、质粒和单克隆抗体 大肠杆菌DH5α购自北京全式金生物技术有限公司.质粒pKD

46、pKD3由扬州大学朱国强教授惠赠;

质粒pET30a(+)/TRAP由黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院细胞生物学实验室构建保存;

pMD18-T载体质粒购自TaKaRa宝生物工程(大连)有限公司. 抗TRAP的单克隆抗体由本实验室周雪提供,抗链球菌GapC1的单克隆抗体由本实验室张丽萌提供. 2.1.2主要仪器设备 试验所用到的主要仪器设备见表2-1. 表2-1 试验用仪器设备 Table2-1 Instruments used in this study 仪器名称生产厂家紫外凝胶成像系统 美国Bio-Rad公司 MULTISKAN MK3型酶标仪 美国Thermo公司 基因定量仪 美国Amersham公司 超声波破碎仪 美国Sonics & Materials Inc.公司 图2-1 引物位置示意图 Fig2-1 Schematic presentation of the site of primers in genes 参考文献[1] Malinowski E, Gajewski Z. Mastitis and fertility disorders in cows[J]. Pol J Vet Sci, 2010,13(3): 555-560. [2] Middleton J R, Luby C D, Adams D S. Efficacy of vaccination against staphylococcal mastitis: a review and new data[J]. Vet Microbiol, 2009,134(1-2):192-198. [3] 马保臣,李建基,王春H.奶牛急性乳腺炎病原菌的分离与鉴定[J].中国兽医杂志,2004,3(11):22-24. [4] 马燕芬,王军,王瑞.奶牛乳房炎病因分析及对策[J].山东畜牧兽医,2005,6(9):12-15. [5] 吴铭秀.南方十二省市奶牛疾病主要防治经验[J].四川奶牛,1992(4):123. [6] 杨克礼,刘士喜,朱先春,等.奶牛临床型乳房炎病原菌分离试验[J].中国奶牛,2000,5(4):43-45. 致谢个人简历 个人情况 姓名: * * 性别: * 民族: * 出生年月: ****年**月 籍贯: **省****** 政治面貌: 教育背景 2005.09-2009.06 黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院 理学学士学位 生物工程专业 2009.09-2012.06 黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院 理学硕士学位 生物化学与分子生物学专业 科研经历 2009.09 C2009.12 黑龙江省农垦总局项目(HNK11A-08-01-04)参加人 2011.06 C2012.06 国家自然科学基金(31072120)参加人 2011.06 C2012.06 黑龙江省研究生创新科研项目(YJSCX2011-249HLJ)主持人 在学期间发表论文 (1) 丁兆凤,汤炜,佟春玉,陈龙欣(通讯作者).奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌对四环素耐药性分析,中国预防兽医学报,2010,32(11):892-894