DOC《2019届高三生物小专题强化训练（5）》

2019届高三生物小专题强化训练(5) (生物技术实践) 1.

(2018・江苏,31)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源.有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本.研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养.下图所示为操作流程,请回答下列问题: (1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的_及时对培养基进行分装,并进行_灭菌. (2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约_填

25 ℃

50 ℃ 或

80 ℃ )的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养. (3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线.下列叙述合理的有_ a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌 b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落 c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量 d.可以通过逐步提高培养基中的甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株 (4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和________供应.为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25*16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上________色细胞的个数应不少于_才能达到每毫升3*109个活细胞的预期密度. 答案 (1)pH 高压蒸汽(湿热) (2)50 ℃ (3)a、b、d (4)氧气 无30 解析 (1)配制培养基时,进行计算、称量、溶解、定容后,需先调节pH再分装到锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌.(2)倒平板时的培养基温度约为50 ℃,冷凝后倒置培养.(3)平板划线时,接种针、接种环使用前和每次划线后都需要进行灼烧灭菌,以免造成杂菌污染,a正确;

划线时不能划破培养基表面,否则不能形成正常菌落,b正确;

挑取菌落时,应挑取多个不同的菌落,分别测定酵母细胞中蛋白质含量,c错误;

逐步提高培养基中甲醇的浓度,能筛选出其中的耐受菌,获得甲醇高耐受菌株,d正确.(4)酵母是兼性厌氧型真菌,在有氧条件下可大量繁殖.酵母扩大培养时,需保证充足的营养和氧气等条件.由题中信息 经等体积台盼蓝染液染色 可知,计数室中培养液容积实际只有0.1÷2=0.05 mm3.设5个中方格中无色(活细胞不能被台盼蓝染色)的细胞数目为x个,则3*109=x/5*25*1 000*1 000÷0.05,解得x=30. 2.(2017・江苏,31)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害.小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株.请回答下列问题: (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO

4、MgSO

4、苯酚和水,其中可作为碳源的有_ (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_以达到富集酚降解菌的目的.若上图平板中菌落过于密集,应进一步_以便于菌落计数与分离.制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加_ (3)下图为连续划线法示意图,在图中_填图中序号)区域更易获得单菌落. (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量.先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5 号比色管的苯酚浓度应分别为_ 管号

1 2

3 4

5 6 苯酚浓度/(mg・L-1)

1 如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21% 的苯酚残留,则需将残留液稀释_填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色. 答案 (1)蛋白胨、苯酚 (2)增加 稀释涂布 凝固剂 (3)③ (4)