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本标准由伊春林业科学院食用菌研究所负责起草,争得部分区局意见后定稿. 本标准由伊春市质量技术监督局批准. 本标准主要起草人:李滇华 高云虹 顾学峰 邢振楠 马珂 吕延芳 本标准于2007年5月首次发布,2015年第一次修订. 无公害黑木耳代料栽培技术规程
1 范围 本标准规定了无公害黑木耳代料生产的生产场地、厂房设置和布局、设备设施、使用品种、生产工艺流程、技术要求、产品初加工和贮藏. 本标准适用于伊春地区无公害黑木耳的代料栽培.
2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件. GB 3095―2012 环境空气质量标准 GB 4285―89 农药安全使用标准 GB 5084―2005 农田灌溉水质标准 NY/T 393―2013 绿色食品 农药使用准则 NY/T 528―2010 食用菌菌种生产技术规程 GB/Tl91 包装储运图示标志 GB
9687 食品包装用聚乙烯成型品卫生标准 GB
9688 食品包装用聚丙烯成型品卫生标准 GB/T 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 GB/T 12728―2006 食用菌术语 NY5098-2002 无公害食品 黑木耳 农农发[2006]62号 食用菌菌种管理办法
3 术语和定义 GB/T 12728―2006 界定的术语,以及下列术语和定义适用于本文件. 3.1 品种variety 经各种方法选育出来具特异性、一致(均一)性和稳定性可用于商业栽培的食用菌纯培养物. [GB/T 12728―2006,2.5.1] 3.2 菌种spawn 生长在适宜培养基质上具结实性的菌丝培养物及其继代培养物,包括母种、原种及栽培种. [GB/T 12728―2006,2.5.6] 3.3 母种stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物,也称一级种、试管种. [GB/T 12728―2006,2.5.7] 3.4 原种 mother spawn 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物.也称二级菌. [GB/T 12728―2006,2.5.8] 3.5 栽培种 pianting spawn 由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物.栽培种只能用于栽培,不可再次扩大繁殖菌种.也称三级菌. [GB/T 12728―2006,2.5.9] 3.6 拮抗现象antagonism 具有不同遗传基因的菌落间产生不生长区带或形成不同形式线行边缘的现象. [GB/T 12728―2006,2.3.21] 3.7 角变sectoring 因菌丝体局部变异或感染病毒而导致菌丝变细、生长缓慢、菌丝体表面特征成角状异常的现象. [GB/T 12728―2006,2.5.17] 3.8 高温圈high -temperature line 食用菌菌种在生产过程中受高温的不良影响,培养物出现的圈状发黄、发暗或菌丝变稀弱的现象. [GB/T 12728―2006,2.5.18] 3.9 耳芽 promordium of Auricularia 尚未分化子实层的木耳属真菌的幼小子实体. [GB/T 12728―2006,2.2.15] 3.10 生物学效率biological efficiency 单位质量培养料的风干物质所培养产生出的子实体或菌丝体质量(鲜重),常用百分数表示.如风干料100kg产生了新鲜子实体50kg,即为生物学效率50%. [GB/T 12728―2006,2.1.27] 3.11 种性characters of variety 食用菌的品种特性,是鉴别食用菌菌种或品种优劣的重要标准之一.一般包括对温度、湿度、酸碱度、光线和氧气的要求,抗逆性、丰产性、出菇(耳)迟早、出菇(耳)潮数、栽培周期、商品质量及栽培习性等农艺性状. [GB/T 12728―2006,2.5.4]
4 菌种生产技术要求 4.1 生产季节 根据栽培季节、生产量的需要安排生产时间,10月~翌年5月初为菌种生产期,母种、原种、栽培种的生产应严格执行NY/T 528-2010. 4.2 场地 菌种生产厂(户)需具备合乎要求的标准生产厂房、交通方便、有水电、地势干燥、环境清洁、空气清新,300m以内无禽畜舍、无垃圾(粪便)场,无污水、废气、废渣烟尘和粉尘污染源,50m内无食用菌栽培场、集贸市场. 4.3 厂房具备的条件(设置、设备、仪器、工具) 4.3.1厂房设置 厂房或车间结构为砖木、砖混结构,水泥地面,四壁、天棚光洁,厂房设计既能密闭保温又能通风. 4.3.2厂内条件 厂内应有水源、电源、供热设施及通风设施. 4.3.3厂房布局 厂房应按工艺流程分设配料室、灭菌室、冷却室、接种室和培养室. 4.3.4配料机具 菌种配料所需基本设备为磅秤、拌料机械(拌料机、铁筛等)、装袋机. 4.3.5灭菌设备 灭菌设备为立式或卧式高压蒸汽灭菌锅、常压蒸汽灭菌锅(灶)等. 4.3.6接种设备 工具 接种设备主要有接种箱、接种机.接种工具有接种锄、接种勺、接种镊、紫外线灯、酒精灯等. 4.3.7菌种培养设备 仪器 菌种培养应有恒温箱、排风机、取暖设施等. 4.3.8消毒药品 常用药品为菇保一号、气雾消毒盒、酒精(75%)、克霉灵、石炭酸(5%苯酚)、新洁而灭(0.25%)等. 4.4使用品种 4.4.1品种 从具有相应技术资质的供种单位引种,且种性清楚.应使用符合国家《食用菌菌种管理办法》规定已登记注册的优良品种,并经过栽培试验证明该品种的种性适应伊春地区气候条件,抗逆性强,菌丝粗壮浓密,洁白,生长迅速,吃料均匀一致,商品性好的品种,如黑29等. 4.4.2移植扩大 母种仅用于移植扩大原种,一支母种移植扩大原种不应超过6 袋(瓶);
一袋原种移植扩大栽培种不应超过30-50 袋. 4.5生产工艺流程 备料→培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养(检查) →成品 4.6生产过程中的技术要求 4.6.1菌种分级 菌种分为一级菌种(母种)、二级菌种(原种)、三级菌种(栽培种). 4.6.2菌种鉴别 4.6.2.1母种 菌丝粗壮、密集、洁白、整齐、呈棉絮状、后期颜色加深、能分泌褐色色素. 使用玻璃试管和棉塞,试管18mm*180mm或20mm*200mm,棉主要使用梳棉,不应使用脱脂棉. 4.6.2.2原种 菌丝洁白、菌丝生长均匀密集,前缘平面整齐,上下一致,菌种瓶(袋)内菌种与瓶(袋)壁紧贴,水球无色为适龄菌种. 使用850ml耐126℃高温无色或近无色的、瓶口直径≤4cm的玻璃瓶或近透明的耐高温的塑料瓶,或15cm*28cm耐126℃高温符合GB9688卫生规定的聚丙烯或聚乙烯塑料袋.各类容器封口部如果使用棉塞,棉塞应符合4.7.1.2规定;
也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞. 4.6.2.3栽培种 菌丝洁白、菌丝生长均匀密集,前缘平面整齐,上下一致,菌种瓶(袋)内菌丝体与瓶(袋)壁紧贴,水球无色为适龄菌种. 使用16.2~16.5cm*33~38cm*0.4c~0.45c的聚乙烯塑料袋,符合GB9688卫生的规定.聚乙烯塑料袋封口部如果使用棉塞或无棉塑料盖,并符合4.6.2.2规定. 4.6.3菌种的贮藏 4.6.3.1母种贮藏:低温保存4℃~6℃冰箱中. 4.6.3.2原种、栽培种贮藏:保存于避光、通风、干燥、0℃~5℃洁净厂房中. 4.7原料 4.7.1化学试剂 这类原料如葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾等,要使用化学纯级试剂. 4.7.2生物制剂 生物制剂如酵母粉和蛋白胨等. 4.7.3天然材料 4.7.3.1木屑用无霉变的柞、桦树等阔叶树木屑. 4.7.3.2主要辅料 麦麸、豆饼粉等,要求新鲜、无虫、无螨、无霉、洁净、干燥. 4.7.4其它辅料 石膏、白灰等,要求不变质、无硬结、干燥. 4.8培养基的配制 4.8.1母种培养基 一般使用PDA培养基. [ NY/T 528―2010附录A.1] 4.8.2原种培养基 根据当地原料资源和所生产品种的要求,使用培养基基础配方①木屑78%,麦麸20%,石膏1%,蔗糖1%.②木屑86.5%,麦麸10%,豆饼粉2%,石膏1%,石灰0.5%.严格掌握含水量和pH值. 4.8.3栽培种培养基 木屑86.5%,麦麸10%,豆饼粉2%,石膏1%,石灰0.5%.严格掌握含水量和pH值. 4.9分装 4.9.1母种 按配方比例秤取各种原料, 用马铃薯浸出汁将琼脂融化,再加入葡萄糖,总量保持在1000mL,然后,分装试管.母种培养基的分装量掌握在试管长度的四分之一至五分之一,灭菌后摆放成的斜面顶端距试管口不少于5Omm,pH值自然. 4.9.2原种 栽培种 按配方比例准确称好主料和辅料,拌料机拌料,搅拌均匀,水分含量在60%~65%,pH值6.5~7.0之间.原种和栽培种培养基装至距瓶(袋)口不少于6Omm,灭菌后不少于45mm. 4.9.3原种 栽培种料袋分装 原种:装料→压实料面→窝口→扎棍→覆棉花→盖纸盖→系胶筋.栽培袋:装料→压实料面→窝口→扎棍.原种和栽培种培养基的上下松紧度要一致.原种湿重1.0K,栽培种湿重1.1~1.2K. 4.10灭菌 4.10.1高压蒸汽灭菌:工作压力在0.11Mpa~0.12Mpa,温度121℃~125℃,母种培养基灭菌30min,原种灭菌需维持1h~1.5h. 4.10.2常压蒸汽........