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产品说明书 OriCell 人脂肪干细胞无血清完全培养基 Cat.

No. HUXMD-90061 目录 产品描述.1 培养基成分.1 稳定性/存储.1 质量控制.1 OriCell 人脂肪间质干细胞的复苏和培养.2 相关产品.5 CBPI0481A2 HUXMD-90061 Page

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6 产品描述 由Cyagen团队推出的OriCell 人脂肪间质干细胞无血清完全培养基,包括无血 清基础培养基和无血清添加物及其他辅助成分.该产品适用于人脂肪间质干细胞 (Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells)无血清条件的培养;

可维 持人脂肪间质干细胞良好的增殖速率,并保持良好的分化能力. 注意:本产品仅用于非临床科研用途,不用于诊断、治疗、临床或其他用途. 培养基成分 Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells Serum Free Basal Medium (Cat. No. HUXMD-03061)

440 mL Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells Serum Replacement (Cat. No. HUXMD-04061)

50 mL Penicillin-Streptomycin

5 mL Glutamine

5 mL 稳定性/存储 1. 所有的产品都需要避光保存. 2. 无血清基础培养基在2-8°C可保存一年.其他添加物在-20°C可保存两年.所有产 品一旦超过标签注释的有效期,必须放弃使用. 3. 配制成完全培养基后,避光保存在2-8°C可存放3周. 4. 为了更好的使用效果,请勿对试剂进行反复冻融. 质量控制 OriCell人脂肪间质干细胞无血清完全培养基均使用赛业OriCell人脂肪间质干细 胞进行性能测试. 产品检测标准包括: CBPI0481A2 HUXMD-90061 Page

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6 ? 微生物检测(细菌、真菌、霉菌及支原体) ? pH检测 ? 渗透压 ? 内毒素 OriCell 人脂肪间质干细胞的复苏和培养 所需材料 ? OriCell 人脂肪间质干细胞无血清培养基 (Cat. No. HUXMD-90061) ? GIBCO TrypLE? Express (1X), Phenol Red (Cat. No. 12605-010) ? Corning CellBIND Surface T25 培养瓶 (Cat. No.

3289 ) ? Corning CellBIND Surface T75 培养瓶 (Cat. No.

3290 ) ? Phosphate-BufferedSaline (1*PBS) (Cat. No. PBS-10001) 提示:所有Corning CellBIND Surface的培养器皿都可用于该培养基的培养. 如需长期培养,可根据需要可加入1%的热灭活自体血浆. 血浆的热灭活处理步骤 1. 设置水浴锅温度为56℃,并放入一支经挑选的温度计,保证设置温度的准确性;

2. 温度升到56℃,将待灭活的血浆(离心管装或者瓶装,管口用封口膜封口)放入 水浴锅,计时30 min;

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30 min后,取出灭活的血浆,如有沉淀物则250 g,10 min离心,离心后上清进行 分装,-20--70℃保存. OriCell 人脂肪间质干细胞无血清完全培养基的制备 1. 在实验开始一小时前,将无血清添加物、青链霉素溶液和谷氨酰胺溶液等添加物 成分放置于2-8°C进行溶解.溶解完成后,轻轻摇晃试剂管使冻融的成分充分混 合. 2. 使用70%酒精消毒试剂盒中各管/瓶的开口外壁. 3. 待试剂管上的酒精挥发干净后,无菌打开各个试剂管. 4. 将各个添加物成分,按试剂体积大小,逐一加入到人脂肪间质干细胞无血清基础 培养基中. 5. 无菌吸取基础培养基洗涤各管子,尽可能的将添加物的所有组分完整的加入基础 CBPI0481A2 HUXMD-90061 Page

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6 培养基中. 6. 重复步骤两到三遍. 7. 轻轻摇晃基础培养基瓶子,使里面的各种成分充分混匀.将配制好的完全培养基 放置于4℃保存. 注意: 本公司的产品均为无菌分装,但是为确保配制过程无菌,建议全部试剂混合之后, 对完全培养基进行再次过滤除菌(0.22 μm). 复苏 1. 准备好人脂肪干细胞无血清完全培养基,温育到37℃. 2. 在15 mL离心管中加入9 mL的人脂肪干细胞无血清完全培养基. 3. 从液氮中取出冻存的脂肪间质干细胞,立即放入-80℃冰箱(目的是让进入冻存管 的液氮稍加挥发). 4. 在-80℃放置2-3 min后,取出冻存细胞,将冻存管迅速放入37℃温水中,快速晃 动令管中内含物尽快融化.仔细观察,待冻存管内含物完全融化后取出. 注意: