PDF《“试管婴儿”技术 3 0 年——回顾和展望》

1203 第12 期林戈,等: 试管婴儿 技术

3 0 年――回顾和展望 2.3 冷冻技术 在IVF 的COH 治疗周期中,患者平均可以获 得6~10 枚胚胎适合移植,即使在移植 2~3 枚胚胎 后,仍有较多的胚胎剩余.通过建立高效的冷冻保 存技术来避免胚胎的浪费就成为了 IVF 不可缺少的 一部分.由此,患者可以在刺激周期失败后再行解 冻胚胎移植,最大限度提高了每次促排卵周期的可 供移植次数,可获得更高的累积妊娠率.在1983 年,Trounson 等[19] 首先将慢速冷冻 - 解冻技术用于 I VF ,成功获得妊娠.此后,这项技术不断改进, 取得了长足的进步,胚胎复苏率由早期的 19%上升 到87%[20] .慢速冷冻法是目前从合子、卵裂期胚 胎到囊胚均广泛采用并且较为成功的冷冻方法,但 使用该技术在冷冻卵子和囊胚的尝试中效果不佳. 近些年来,冷冻方法在逐渐向玻璃化冷冻技术转 移.与慢速冷冻在缓慢降温过程中逐渐使细胞脱水 不同,玻璃化采用高浓度的冷冻保护剂在冷冻前进 行预处理,置换胞浆内的大部分水分子,冷冻时 快速投入液氮后,迅速形成玻璃样固体,有效排 除了细胞内外冰晶形成造成的冷冻损伤.由于玻璃 化冷冻需要极快的降温速度并尽量减少高浓度的 冷冻保护剂的毒性作用,目前多采用微型载体,如Cryoloop 和电镜铜珊等,通过极度缩小含胚胎玻璃 化溶液的体积(1~2μl)来实现 即时玻璃化 ,使 降温速率提高到

20000 °C/ min 以上,有效避免了 细胞内冰晶形成,提高了冷冻效率[21] .采用玻璃化 冷冻技术冷冻各个发育阶段的胚胎以及卵子,均取 得了良好的临床效果.不过,高浓度冷冻保护剂的 应用对胚........