PDF《中华人民共和国国家标准》

另一份中加连二亚硫酸钠少许, 摇匀后,黄色即消褪,荧光亦消失. A.3.2 紫外-可见吸收光谱鉴别 A.3.2.1 方法原理 维生素 B2 (核黄素)具苯环结构,有多个共轭双键,其紫外-可见吸收光谱中有三个吸收峰(444 nm,375 nm 与267 nm) ,用A444nm /A267nm 及A375nm /A267nm 的比值来鉴别维生素 B2(核黄素) . A.3.2.2 试剂和材料 A.3.2.2.1 冰乙酸. A.3.2.2.2 乙酸钠溶液:14 g/L. A.3.2.2.3 实验室样品溶液:避光操作.取约0.075 g实验室样品,精确至0.001 g,置烧杯中,加1 mL 冰乙酸与75 mL水,加热溶解后,加水稀释,冷却至室温,移置500 mL棕色容量瓶中,再加水稀释至 www.grainnet.cn GB 14752―2010

4 刻度,摇匀;

精密量取10 mL,置100 mL棕色容量瓶中,加7 mL乙酸钠溶液,并用水稀释至刻度,摇匀. A.3.2.3 仪器和设备 A.3.2.3.1 紫外-可见分光光度仪. A.3.2.3.2 石英池(1cm) . A.3.2.4 分析步骤 取实验室样品溶液扫描,在波长

444 nm±1 nm、375 nm±1 nm 与267 nm±1 nm 处有最大吸收, 并测定吸光度(A) ,计算 A375nm/A267nm 的比值为 0.31~0.33 和A444nm/A267nm 的比值为 0.36~0.39. A.3.3 红外光吸收图谱鉴别 A.3.3.1 试剂和材料 溴化钾:光谱纯,干燥品. A.3.3.2 分析步骤 在红外灯下进行,以防止吸潮. 将实验室样品和溴化钾粉末置入玛瑙乳钵中研匀,装入压片模具制备样片并进行扫描.本品的 红外光吸收图谱应与对照的图谱(附录 B)一致. A.4 维生素B2 的测定 A.4.1 方法原理 维生素 B2(核黄素)具苯环结构,有多个共轭双键,在波长

444 nm 处有最大吸收,将样品溶 液于该波长处测定吸光度,以百分吸光系数( 1% 1cm E )计算即得其质量分数. A.4.2 试剂和材料 A.4.2.1 冰乙酸. A.4.2.2 乙酸钠溶液:14 g/L. A.4.3 仪器和设备 同A.3.2.3. A.4.4 分析步骤 取实验室样品溶液(A.3.2.2.3) ,在波长444 nm ±1nm处,以水为空白对照,测定吸光度(A) . A.4.5 结果计算 维生素 B2(核黄素)的质量分数 w1,数值以%表示,按公式(A.1)计算:

1 2

5000 100%

323 (1 )

100 A w m w * = * * * ? * A.1) 式中: 5000――实验室样品稀释体积,单位为毫升(mL);

323――维生素 B2(核黄素)的百分吸光系数( 1% 1cm E ) ;

A ――实验室样品溶液(A.3.2.2.3)的吸光度数值;

m ――实验室样品质量的数值,单位为克(g) ;

2 w ――A.7 测得的干燥减量的数值, %. 两次平行测定结果的绝对差值不大于1.5%. www.grainnet.cn GB 14752―2010

5 A.5 比旋光度的测定 A.5.1 方法原理 维生素 B2(核黄素)的核糖醇侧链 2,3,4-位有三个不对称碳原子,具有旋光活性,在碱性条件 下,呈左旋光性,以此检查样品的比旋度. A.5.2 试剂和材料 A.5.2.1 二硝基苯肼试液:取1.5 g 2,4-二硝基苯肼,加20 mL硫酸溶液(1+1) ,溶解后,加水使成

100 mL,过滤. A.5.2.2 无醛乙醇:取2.5 g乙酸铅,置具塞锥形瓶中,加5 mL水溶解后,加1000 mL乙醇,摇匀, 缓缓加25 mL乙醇制氢氧化钾溶液(1→5) ,放置1h,强力振摇后,静置12h,倾取上清液,蒸馏即得. 检查:取25 mL 无醛乙醇,置锥形瓶中,加75 mL 二硝基苯肼试液,置水浴上加热回流 24h,蒸 去乙醇,加200 mL 硫酸溶液(2→100) ,放置 24h 后,应无结晶析出. A.5.2.3 盐酸标准滴定溶液:c(HCl)=0.1 mol/L. A.5.2.4 无碳酸盐氢氧化钾溶液:取20 g氢氧化钾,加100mL无醛乙醇,放置过夜后,吸取上清液, 加无醛乙醇稀释成0.1 mol/L的溶液,用0.1 mol/L盐酸标准滴定溶液标定后,再精密量取18 mL,加新 沸过的冷水至100 mL,摇匀. A.5.2.5 实验室样品溶液:称取约0.25 g实验室样品,精确至0.000