PDF《广州中医药大学学报》

换 湿盒,重 复 上述处理 ,P B S 洗 3次 ;

滴加生物素化二抗工作液 ( I g G / B i o )5

0 ,微波炉一档温盒内微波处理2.5min,放置 至8min,P B S漂洗 3次 ;

滴 加辣根 酶标记链酶卵 白素工作液 ( s . A / H R P )

5 0 L ,微波 炉一 档湿盒内微 波处理2.5min,放 置至8min,PBS漂洗 3次;

D A B显色

3 m i n ,P B S洗 3次 ;

苏木 素复染 ,二甲苯透 明,封片后观察结果 ;

用已知阳 性片作为阳性对照 ,用PBS替代一抗作阴性 对照, 细胞核中有棕褐色颗粒者为阳性染色细胞 .根据染 色程度及染色细胞百分率进行分析评定 :基本不着 色者 为 0分 ,着色淡 者为 1分 ,着 色较深者 为2分,着色最深者为 3分 ;

每张切片至少计数

5 0 0个 海马神经元细胞 ,计算平均每

1 0

0 个细胞内的阳性 细胞数 ,以百分数表示染色细胞百分率 ;

将每张切 片染色程度与染色细胞百分率相乘 ,所得数值为阳 性 表达指 数.1.4.3相关性 分析 对穴位埋药线组 、苯妥英钠 组 、常 规针 刺组 及模 型组的c.jun、b c

1 . 2蛋白阳性 表达指数分别与 A I 进行相关性分析.

1 .

4 .

4 数据处理 结果用 ( ±s )表示 ,t 检验 , 采用 S P S S

1 1 . 0统计软件处理 .

2 结果穴位埋药线疗法对 s E后大 鼠海马神经元凋亡 及相 关基 因表 达 的影响 结果 见表

1 、图

1、图

2 .对表1结果行相关分析后可知 :穴位埋药线组 、苯妥 英钠组 、常规针刺组 及模 型组 的c.jun蛋 白阳性表 达指数与 A I 均呈正相关 ( P