PDF《姚斌甲磺隆对土壤微生物多样性的影响*_姚斌》

* 国家自然科学基金 ( 40171051) 、 浙江省自然科学基金(RC99032) 和高校优秀青年教师奖励基金资助 通讯作者, E -mail: jxu@ mail.

hz. zj. cn 作者简介: 姚斌( 1973~ ) , 男, 汉族, 博士研究生.研究方向为土壤化学与环境 收稿日期: 2002- 10- 10;

收到修改稿日期: 2003- 05-

26 甲磺隆对土壤微生物多样性的影响* 姚斌徐建民 张超兰 ( 浙江大学土水资源与环境研究所, 杭州 310029) EFFECT OF METSULFURON -METHYL ON MICROBIAL DIVERSITY IN PADDY SOIL Yao Bin Xu Jianmin Zhang Chaolan ( Institute of Soil and Water Resources and Environmental Science, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China) 关键词 甲磺隆;

土壤;

微生物群落;

多样性指数 中图分类号 S154

37 文献标识码 A 甲磺隆是国内外现阶段广泛使用的一种新型除 草剂, 用量少、 生物活性高、 对人畜低毒等是它的显 著特点.已有研究者就该种除草剂在正常用量下对 土壤呼吸作用[ 1] 、 硝化作用[ 2] 、 土壤酶活性[ 3] 、 土壤 微生物生物量[ 4] 等进行了研究.相比较而言, 甲磺 隆除草剂污染区土壤微生物多样性变化的研究鲜见 报道.BIOLOG 碳素利用法是一种较为先进的研究 不同环境下的土壤微生物群落结构和多样性的方 法[ 5] .该方法已广泛应用于鉴定和分析不同体系中 的土壤微生物群落结构[ 5] 、 同一土壤不同作物栽培 条件下的微生物群落结构 [ 6] 、 重金属污染土壤微生 物群落结构分析[ 7] 等方面.然而利用 BIOLOG 微平 板对农药污染土壤微生物群落多样性影响的研究却 鲜见报道.鉴于此, 本研究在人为设定的甲磺隆除 草剂污染浓度(

10 mg kg-

1 ) 下采用碳源利用法( BI - OLOGTM ECOMicroPlate) 测定实验室培养条件下土壤 微生物种群对甲磺隆除草剂污染的动态响应, 旨在 揭示不同培养时期甲磺隆除草剂对土壤微生物群落 结构和多样性的影响.

1 材料与方法

1 1 供试土壤 供试土壤为黄筋泥水稻土, 采自浙江省龙游县, 表层( 0~

20 cm) 新鲜土样采集后拣去植物残体, 分 成两部分, 一部分土样直接过

2 mm 筛, 混合均匀, 供培养试验用.另一部分土样风干后, 研磨过筛, 用 于土壤基本性质的测定.供试土壤的 pH 为496, 有机碳和全氮分别为

6 05 g kg-

1 和15gkg-

1 , 阳 离子交换量为

9 0 cmol kg-

1 , 粗砂、 细砂、 粉砂和粘 粒分别占

4 5%、

70 9% 、

3 0% 和21 6% .

1 2 供试除草剂 甲磺隆由江苏省激素研究所提供, 纯度 92%.

1 3 除草剂污染土样的制备 将过

2 mm 筛的供试土样从

4 冰箱中取出, 置于25 恒温生化培养箱预培养7 d,称取相当于

100 g 烘干土样的新鲜土样放入250 ml 三角瓶, 加去离子水 调节土壤含水量到田间最大含水量的40%, 然后准确 加入

1 000 g ml-

1 的甲磺隆的甲醇溶液

1 0 ml, 待甲 醇挥发并搅匀土壤后加橡皮塞, 制得

10 mg kg-

1 甲 磺隆污染土样;

于25 恒温生化培养箱中进行暗培 养, 重复

3 次.培养过程中损失的水分通过称重法 给以补充, 培养后第

2 天、

10 天和

30 天取样进行微 生物多样性分析.

1 4 土壤微生物碳源利用多样性分析( BIOLOGTM ) 土壤微生物碳源利用多样性应用 BIOLOG TM 生态 测试板( ECO MicroPlate, 美国 Matrix Technologies Cor - poration 生产) 测定.称取相当于

10 g 烘干土重的新 鲜土样加入内有