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福建信发招标代理有限公司关于福建省动物疫病预防控制中心2015年试剂采购项目的 补充公告2 1.

招标项目: 福建省动物疫病预防控制中心2015年试剂采购项目 2. 招标编号: XFZB-2015-19 3.采购人: 福建省动物疫病预防控制中心 联系人:饶静静 联系方式:0591-87857110 4.采购代理机构: 福建信发招标代理有限公司 地址: 福州市五一中路188号汉庭酒店2楼(汽车南站旁) 联系人:孙秀娟 联系方式:0591-88002309 传真:0591-88002607 5.首次公告日期:2015年5月25日6.变更内容: (1)招标文件第10页合同包4品目号4-1 禽白血病抗原 规格原先的192次/盒变更为480次/盒,同时招标文件第229页技术参数中禽白血病抗原规格由(96孔*2板)/盒变更为(96孔*5板)/盒. (2)第10页合同包4品目号4-5 PRV gb抗体 规格原先的480次/盒,变更为576次/盒,同时招标文件第235页技术参数中规格原先的480次/盒变更为576次/盒(3)第10页合同包4品目号4-6 PRV ge抗体 规格原先的480次/盒变更为576次/盒,同时招标文件第238页技术参数中规格原先的480次/盒变更为576次/盒(4)第10页合同包4品目号4-3由原先的: 4-3 传染性喉气管炎抗体 传喉气抗体检测 480次/盒 变更为: 4-3 传染性支气管炎抗体 支气管抗体检测 480次/盒 同时在招标文件的232-234页中包4品目号4-3的技术参数由原先的 品目号4-3 传染性喉气管炎抗体 传喉气抗体检测 传染性喉气管炎(ILT)抗体ELISA检测试剂盒,可以从鸡的血液样品中检测ILT抗体的量.微量板用已灭活的ILT抗原包被,将稀释的鸡血清样品加入到微量孔中,样品中ILT抗体将与包被的抗原形成抗原抗体复合物.非特异性抗体和其它血清蛋白被洗去.将碱性磷酸酶标记的抗鸡IgG抗体加入孔中,与抗原抗体复合物结合,然后再洗去未反应的结合物.pNPP显色剂作为底物被加入,如果ILT抗体存在,则显黄色.颜色强度与样品中抗ILT抗体的含量相关. 提供的试剂 ILT包被板 (Coated plates): 包被有灭活病毒抗原的微量板. 酶标二抗 (Conjugate reagent) :碱性磷酸酶标记的抗鸡抗体:内含蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂(0.1% 重量/体积)及红色染料的磷酸盐缓冲液. 底物片(Substrate tablets) PNPP(4-硝基苯磷酸二钠盐):用底物缓冲液溶解后使用. 底物缓冲液(Substrate buffer):含有与酶反应相关物质的二乙醇胺缓冲液. 终止液(Stop Solution):含有NaOH的二乙醇胺缓冲液. 样品稀释液(Sample Diluent):含有蛋白稳定剂和叠氮化钠(0.1% 重量/体积)的磷酸盐缓冲液. 洗液(Wash Buffer):含有吐温的磷酸盐缓冲液(粉). 阴性对照(Negative Control):含SPF鸡血清的磷酸盐缓冲液:内含有蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂(0.1% 重量/体积)及蓝色染料. 阳性对照(Positive Control):含特异性ILT抗体的磷酸盐缓冲液:内含有蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂(0.1% 重量/体积)及红色染料. 材料和设备要求(试剂盒未提供) 精确的微量移液器和一次性吸头 8或12孔道的微量移液器 稀释样品的塑料管 蒸馏水或去离子水 含405nm波长的酶标仪 注意事项 1.处理各种试剂要小心.终止液中含有腐蚀性的强碱,如果溅到皮肤或眼中,用大量的清水洗涤. 2.把各种生物材料都看成具有潜在的生物危险性物,包括所有的外来样品.在销毁之前,要用漂白粉或其它强氧化剂,将用过的反应板和废弃液进行消毒. 3.不要用嘴碰移液器.在使用试剂盒中的试剂和处理样品的地方,不要吃东西,喝水或吸烟. 4.试剂盒仅供体外使用. 5.严格按照检测规程操作才能取得最好的结果. 试剂的准备 1.底物试剂:取1片底物放入洁净容器中,加入5.5-6ml的底物缓冲溶液,混合直到完全溶解.本试剂最好是现用现配,配置好的底物溶液可以在+4℃下避光保存1周.请勿用手直接触拿底物片. 2.洗液:将1袋洗液完全倒入1升蒸馏水或去离子水中,混合使其完全溶解.洗液可在+4℃保存1个月. 3.试剂盒中的其它成分可以直接使用,使用前要回温至室温(22-27℃). 样品的准备 每个样品按照1:500稀释,即1μl样品加0.5ml的样品稀释液. 1.用旋涡混合器或振荡器混合均匀. 2.每份样品都要换一个未用过的新吸头. 3.稀释管清晰地标有样品号. 试剂盒中的阳性和阴性对照不要稀释! 操作步骤 1.从密封袋中取出用ILT包被的反应板,在记录纸上记录样品的位置. 2.在A1和B1孔中加入100μl的阴性对照. 3.在C1和D1孔中加入100μl的阳性对照. 4.加100μl稀释好的样品加入到相应的板孔中,用盖子盖住反应板,在室温(22-27℃)下孵育60分钟. 5.倒出孔中的内容物,用洗液洗4次(每孔300μl).最后一次倒转反应板,在吸水纸上轻轻拍打. 6.各孔加100μl酶标二抗,用盖子盖住反应板,在室温(22-27℃)下孵育60分钟. 7.重复步骤5. 8.各孔加100μl底物试剂,用盖子盖住反应板,在室温(22-27℃)下孵育30分钟. 9.各孔加100μl终止液,终止反应. 10.空气调零,以405nm的波长于酶标仪测定各孔的吸光度. 结果 为确保试验有效,阴性对照的平均吸光度应该小于0.3,阳性对照的平均值和阴性对照的平均值之差应大于0.15. 实验室的温度不同,所得到的结果会有误差.根据实验对照的结果判定实验的有效性. 阳性对照是标准化的试剂,它代表ILT抗体的含量.样品中抗体的含量可以通过阳性对照来计算.用S/P值(样品与阳性对照的比值)来表示抗体. 结果判定 1.S/P值的计算 S/P值大于等于0.5 可判定为阳性 2.抗体滴度的计算 Log10效价=1.1*Log10S/P + 3.361 逆对数=效价 3.判定标准 S/P值 效价范围 抗体状况 ≤0.499 ≤1070 阴性 ≥0.500 ≥1071 阳性 变更为: 品目号4-3 传染性喉气管炎抗体 支气管抗体检测 传染性支气管炎病毒抗体检测试剂盒是用于检测鸡血清中传染性支气管炎病毒(IBV)抗体的酶联免疫检测试剂盒. 概述 传染性支气管炎的血清学鉴定和免疫状态的评估需要检测血清中 IBV 抗体水平.酶联免疫 测定系统被证明在 IBV 抗体水平的定量检测中是有效的,适用于鸡群免疫状态的监测. 原理 本试验设计用于检测鸡血清中 IBV 抗体的相对水平.本试验用 IBV 病毒抗原包被