DOC《中文说明书 UNIONHONEST》

中文说明书 UNIONHONEST 酶联免疫吸附测试 Enzyme Linked Immunosorbent Assay 人(Human)雌激素(Estrogen)ELISA 检测试剂盒 本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆 试验原理: Estrogen试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).

已知Estrogen浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测.先将Estrogen和生物素标记的抗体同时温育.洗涤后,加入亲和素标记过的HRP.再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用.产生颜色.颜色的深浅和样品中Estrogen的浓度呈比例关系. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制 96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品:400pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型 生物素标记的抗Estrogen抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型 洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释 底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 标本稀释液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型 自备材料 蒸馏水. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul. 振荡器及磁力搅拌器等. 安全性 避免直接接触终止液和底物A、B.一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份. 操作注意事项 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温.稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质. 不用的其它试剂应包装好或盖好.不同批号的试剂不要混用.保质前使用. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器. 使用干净的塑料容器配置洗涤液.使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下.避免用手接触,有毒.实验完成后应立即读取OD值. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作. 样品收集、处理及保存方法 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激.使用不含热原和内毒素的试管.收集血液后,1000*g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离. 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测.1000*g离心30分钟去除颗粒. 细胞上清液---1000*g离心10分钟去除颗粒和聚合物. 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎.1000*g离心10分钟,取上清液 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻.尽可能的不要使用溶血或高血脂血.如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤.不要在37℃或更高的温度加热解冻.应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻. 试剂的准备 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存.稀释前将标准品振荡混匀.稀释比例按下表中进行:

400 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul.