DOC《第三届全国魔芋种植基地建设经验交流会》

2 The differentiation cultures of calli in Amorphophallus konjac 分化培养基 分化前的诱导培养基 愈伤组织数(块) 培养天数 分化数(块) 分化率(%) 褐变数(块) 褐变率(%) ⑥ ①

40 20

5 13

35 88 ⑥ ②

40 20

8 20

32 80 ⑥ ③

40 20

15 38

22 55 ⑥ ④

40 20

25 63

4 10 ⑥ ⑤

40 20

30 75

2 5 ④ ④

40 20

39 98

1 2.5 ⑤ ⑤

40 20

38 95

1 2.5 前置培养基(诱导培养基)的激素浓度及成份对以后的分化培养有着很大的影响: 2.1 在相同分化培养基上培养,随着前置诱导培养基2,4-D浓度的不断降低,愈伤组织的分化率也随之提高,2,4-D浓度从0.2 mg ・ L-1降到0.05 mg ・ L-1时化分率由13%提高到38%. 2.2 诱导培养基的生长素由NAA代替2,4-D时在分化培养时分化率大幅度的提高,达60%以上. 2.3 ④、⑤诱导培养基上诱导的愈伤组织继续转入新配制的④、⑤培养基上继续培养,愈伤组织边形成新的愈伤组织边分化幼苗(图2). 2.4 ④、⑤培养基比较,⑤培养基上生长的苗更壮,并且在分化过程中能形成良好的根系,无需在转入生根培养基中就能形成一株完整的植株(图3).且材料一边分化幼芽一边又形成新的愈伤组织培养,愈伤组织的分化率高达95%以上. 图2 分化幼芽时诱导出新的愈伤组织 图3 分化幼芽时形成健壮的根系

3 生根培养 在⑥、④培养基上分化的幼苗植入生根培养基⑦中,约10-15天就可长出发育良好的根系.

4 移栽 将在⑦生根培养基上生根的幼苗和在⑤培养基中一步成苗幼苗的出瓶洗净根部所带的培养基,移栽到苗床上,经约6-8个月生长能形成50-100克左右的种芋. 讨论据前人[2,3,4]的研究,魔芋的组织培养主要采用外植体→愈伤组织(诱导培养)→分化幼苗(分化培养)→生根(生根培养)等多个培养程序.本试验经过多个培养基的筛选、比较、表明以魔芋顶端生长点为培养材料,诱导培养基的激素浓度及成份对其组织培养成功与否及成本的高低至关重要.在培养基的成份中可调节幅度最大的是植物生长调节物质,主要是生长素和细胞分裂的比例,对多数植物材料来说,2,4-D是诱导愈伤组织和细胞悬浮培养的最有效物质,常用浓度为0.2-2.0mg ・ L-1 [5] ,但在对魔芋顶端生长点的诱导培养中,极少量的2.4-D(0.05mg・ L-1)就能抑制材料愈伤组织诱导、生长、并且还会引起材料的褐变导致细胞的死亡.这种影响在分化培养时也难以消除,使其分化率大大下降,而浓度为0.5~1mg・ L-1的NAA同时加入6BA 1mg・ L-1(④、⑤培养基)对魔芋顶端生长点的细胞和组织的生长、分化有很好诱导及促进作用.在⑤培养基上培养的材料,苗的生长比④培养基上培养的苗壮,并能生长出发育良好的根系,形成一株完整的植株.本试验采用⑤培养基培养魔芋的生长点能一步成苗,其培养方法及器官分化途径是:在常规培养条件下(培养温度25+2℃,每日照8 h,光强1500lux)剥取外植体顶端生长点接种在培养基培养⑤上,经约38天的培养就一步成苗(诱导、分化、生根培养在同一培养基上),并且成苗率非常高(95%).整个培养过程仅只38天(表3),缩短了培养周期、简化了培养程序,提高了出苗率、降低了生产成本,为魔芋组培技术产业化的运作提供了保正. 表3 一步成苗法同常规培养法的比较 Table

3 A comparison of One-step-seedling-formation culture and normal cultural method 培养方法 培养基 培养天数 成苗率(%) 一步成苗法 ③