编辑: huangshuowei01 | 2019-07-10 |
3、培养基和试剂 3.1 质控菌株:空肠弯曲杆菌标准菌株(ATCC 33560) 3.2 DNA Marker 3.3 引物及扩增片段长度 3.3.1 引物 空肠弯曲菌:上游 5'
CAT CTT CCC TAG TCA AGC CT 3'
,下游 5'
AAG ATA TGG CAC TAG CAA GAC 3'
,扩增片段长度为 773bp. 结肠弯曲杆菌:上游:AGG CAA GGG AGC CTT TAA TC,下游:TAT CCC TAT CTA CAA ATT CGCTAT CCC TAT CTA CAA ATT CGC,扩增片段长度为364bp. 3.4 运送培养基 3.5 弯曲菌选择性(CCD)培养基 3.6 哥伦比亚血琼脂培养基 3.7 生理盐水 3.8
10 *PCR 缓冲溶液Ⅱ 3.9 氯化镁溶液(25mM) 3.10 Taq 聚合酶(0.5U/μL) 3.11 dNTPs(2mM) 3.12 琼脂糖 3.13 50*TAE缓冲液:将242gTris碱,57.1mL冰乙酸,100mL0.5M EDTA(pH8.0),加纯水至1000mL. 1*TAE缓冲液: 临用时将50*TAE缓冲液1份加蒸馏水49份,混匀即可. 3.14 上样缓冲液 3.15 溴化乙锭溶液(10mg/mL):称取1g溴化乙锭溶于100mL水中,用磁力........