PDF《中华人民共和国国家标准》

中华人民共和国国家标准GB 4789.

4―2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 National food safety standard Food microbiological examination: Salmonella 中华人民共和国卫生部发布 2010-03-26 发布 2010-06-01 实施 GB 4789.4―2010 I 前言本标准代替 GB/T 4789.4-2008《食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验》 . 本标准与 GB/T 4789.4-2008 相比,主要变化如下: ――修改了标准的中英文名称;

――修改了标准的范围;

――修改了培养基和试剂;

――修改了设备和材料;

――修改了附录 A. 本标准的附录 A、附录 B 为规范性附录. 本标准所代替的历次版本发布情况为: ――GB 4789.4-

84、GB 4789.4-

1994、GB/T 4789.4-

2003、GB/T 4789.4-2008. GB 4789.4―2010

1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验

1 范围 本标准规定了食品中沙门氏菌(Salmonella)的检验方法. 本标准适用于食品中沙门氏菌的检验.

2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下: 2.1 冰箱:2 ℃~5 ℃. 2.2 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,42 ℃±1 ℃. 2.3 均质器. 2.4 振荡器. 2.5 电子天平:感量 0.1 g. 2.6 无菌锥形瓶:容量

500 mL,250 mL. 2.7 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度) 、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头. 2.8 无菌培养皿:直径

90 mm. 2.9 无菌试管:3 mm*50 mm、10 mm*75 mm. 2.10 无菌毛细管. 2.11 pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸. 2.12 全自动微生物生化鉴定系统.

3 培养基和试剂 3.1 缓冲蛋白胨水(BPW) : 见附录 A 中A.1. 3.2 四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液:见附录 A 中A.2. 3.3 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液:见附录 A 中A.3. 3.4 亚硫酸铋(BS)琼脂:见附录 A 中A.4. 3.5 HE 琼脂:见附录 A 中A.5. 3.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂:见附录 A 中A.6. GB 4789.4―2010

2 3.7 沙门氏菌属显色培养基. 3.8 三糖铁(TSI)琼脂:见附录 A 中A.7. 3.9 蛋白胨水、靛基质试剂:见附录 A 中A.8. 3.10 尿素琼脂(pH 7.2) :见附录 A 中A.9. 3.11 氰化钾 (KCN) 培养基:见附录 A 中A.10. 3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基:见附录 A 中A.11. 3.13 糖发酵管:见附录 A 中A.12. 3.14 邻硝基酚 β-D 半乳糖苷(ONPG)培养基:见附录 A 中A.13. 3.15 半固体琼脂:见附录 A 中A.14. 3.16 丙二酸钠培养基:见附录 A 中A.15. 3.17 沙门氏菌 O 和H诊断血清. 3.18 生化鉴定试剂盒. GB 4789.4―2010

3 4 检验程序 沙门氏菌检验程序见图 1. 图1沙门氏菌检验程序

5 操作步骤 5.1 前增菌 称取

25 g(mL)样品放入盛有

225 mL BPW 的无菌均质杯中,以8000 r/min~10

000 r/min 均质

1 min~2 min,或置于盛有

225 mL BPW 的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打

1 min~2 min.若样 品为液态, 不需要均质, 振荡混匀. 如需测定 pH 值, 用1mol/mL 无菌 NaOH 或HCl 调pH 至6.8±0.2. 检样

36 ℃±1 ℃,8 h~18 h TSI,赖氨酸,NA, 靛基质, 尿素 (pH 7.2),KCN 挑取可疑菌落 BS XLD(或HE、显色培养基)

1 mL+TTB

10 mL

1 mL+SC

10 mL

25 g(mL)样品+225 mLBPW H2S+ 靛基质-尿素-KCN- 赖氨酸 + H2S+ 靛基质+尿素- KCN- 赖氨酸+ H2S-靛基质-尿素-KCN- 赖氨酸+/- 反应结果与左 侧描述不符 生化鉴定试剂盒或全 自动微生物生化鉴定 系统+

42 ℃±1 ℃,18 h~24 h

36 ℃±1 ℃,18 h~24 h

36 ℃±1 ℃,40 h~48 h

36 ℃±1 ℃,18 h~24 h 甘露醇+、山梨醇+ ONPG- 报告 非沙门氏菌 沙门氏菌,血清学试验 GB 4789.4―2010