PDF《中华人民共和国国家标准》

5 进行沙门氏菌生化群的鉴别. 表5沙门氏菌属各生化群的鉴别 项目 卫矛醇 山梨醇 水杨苷 ONPG 丙二酸盐 KCN 注:+表示阳性;

-表示阴性. 5.4.3 如选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统,可根据 5.4.1 的初步判断结果,从营 养琼脂平板上挑取可疑菌落,用生理盐水制备成浊度适当的菌悬液,使用生化鉴定试剂盒或全自动 微生物生化鉴定系统进行鉴定. 5.5 血清学鉴定 5.5.1 抗原的准备 一般采用 1.2%~1.5%琼脂培养物作为玻片凝集试验用的抗原. O 血清不凝集时,将菌株接种在琼脂量较高的 (如2%~3%) 培养基上再检查;

如果是由于 Vi 抗原的存在而阻止了 O 凝集反应时,可挑取菌苔于

1 mL 生理盐水中做成浓菌液,于酒精灯火焰 GB 4789.4―2010

6 上煮沸后再检查.H 抗原发育不良时,将菌株接种在 0.55%~0.65%半固体琼脂平板的中央,俟菌落 蔓延生长时,在其边缘部分取菌检查;

或将菌株通过装有 0.3%~0.4%半固体琼脂的小玻管

1 次~2 次,自远端取菌培养后再检查. 5.5.2 多价菌体抗原(O)鉴定 在玻片上划出

2 个约

1 cm*2 cm 的区域,挑取

1 环待测菌,各放 1/2 环于玻片上的每一区域上 部,在其中一个区域下部加

1 滴多价菌体(O)抗血清,在另一区域下部加入

1 滴生理盐水,作为对 照.再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌落研成乳状液.将玻片倾斜摇动混合

1 min,并对 着黑暗背景进行观察,任何程度的凝集现象皆为阳性反应. 5.5.3 多价鞭毛抗原(H)鉴定 同5.5.2. 5.5.4 血清学分型(选做项目) 5.5.4.1 O 抗原的鉴定 用A~F 多价 O 血清做玻片凝集试验,同时用生理盐水做对照.在生理盐水中自凝者为粗糙形 菌株,不能分型. 被A~F 多价 O 血清凝集者,依次用 O4;

O

3、O10;

O7;

O8;

O9;

O2 和O11 因子血清做凝集 试验.根据试验结果,判定 O 群.被O

3、O10 血清凝集的菌株,再用 O

10、O

15、O

34、O19 单因 子血清做凝集试验,判定 E

1、E

2、E

3、E4 各亚群,每一个 O 抗原成分的最后确定均应根据 O 单因 子血清的检查结果,没有 O 单因子血清的要用两个 O 复合因子血清进行核对. 不被 A~F 多价 O 血清凝集者,先用

9 种多价 O 血清检查,如有其中一种血清凝集,则用这种 血清所包括的 O 群血清逐一检查,以确定 O 群.每种多价 O 血清所包括的 O 因子如下: O 多价

1 A,B,C,D,E,F,群 (并包括 6,14 群) O 多价

2 13,16,17,18,21 群O多价

3 28,30,35,38,39 群O多价

4 40,41,42,43 群O多价

5 44,45,47,48 群O多价

6 50,51,52,53 群O多价

7 55,56,57,58 群O多价

8 59,60,61,62 群O多价

9 63,65,66,67 群5.5.4.2 H 抗原的鉴定 属于 A~F 各O群的常见菌型,依次用表

6 所述 H 因子血清检查第

1 相和第

2 相的 H 抗原. 表6A~F 群常见菌型 H 抗原表 O 群第1相第2相ABBC1 C2 D( 不产气的) D(产气的) E1 E4 E4 a g,f,s i,b,d k,v,r,c b,d,r d g,m,p,q h,v g,s,t i 无无25,Z15 2,5 无无6,w,x 无GB 4789.4―2010

7 不常见的菌型,先用

8 种多价 H 血清检查,如有其中一种或两种血清凝集,则再用这一种或两种 血清所包括的各种 H 因子血清逐一检查,以第

1 相和第

2 项的 H 抗原.8 种多价 H 血清所包括的 H 因子如下: H 多价

1 a,b,c,d,i H 多价

2 eh,enx,enz15,fg,gms,gpu,gp,gq,mt,gz51 H 多价

3 k,r,y,z,z10,lv,lw,lz13,lz28,lz40 H 多价

4 1,2;

1,5;

1,6;