PDF《PS W 22 W》

其它试剂均为分析纯.实验用水为超纯水.

2 .

2 分析条件 (

1 ) 色谱条件: 一级柱: A g i l e n t S B -C

1 8柱(

1 0 0m m*

2 . 1m m ,5μ m) ;

二级 柱: A g i l e n t S B -C

1 8柱(

1 5

0 m m*

2 . 1m m , 5μ m ) ;

一级流动相: 甲醇-水(

3 0 ∶

7 0 ) , 流速:

0 . 8m L / m i n . (

2 ) 质谱条件: 电喷 雾离子源;

负离子检测;

喷雾电压

3 . 5k V ;

毛细管电 压-1

0 1V , 毛细管温度

1 8

0 ℃;

干燥气流速 7L / m i n ;

干燥气温度

3 2

5 ℃;

雾化气压力

3 5p s i ;

雾化气温度

3 2

5 ℃, 相对碰撞能为 第33卷

2 0

0 5年 4月 分析化学 ( F E N X I H U A X U E ) 研究简报 C h i n e s eJ o u r n a l o f A n a l y t i c a l C h e m i s t r y 第 4期

5 0 5~

5 0

8 P S

2 2 P D F ( T r i a l V e r s i o n ) W W W . C C Y T . N E T

6 0 %;

化合物稳定性

4 0 %;

质量扫描范围

5 0~

4 0 0a m u ;

刮削器电压 -

4 0V .

2 .

3 样品制备

2 .

3 .

1 对照品溶液的制备 称取一定量的丹参素对照品, 加二级流动相配成

0 .

2 4 6g / L对照品溶液.

2 .

3 .

2 血清供试品溶液的制备 健康志愿者

5 名, 空腹舌下含服

1 0粒复方丹参滴丸,

2 . 0h 后, 静脉取 血1.0m L , 离心

1 0m i n (

1 2

0 0 0r / m i n ) , 取血清样品

0 . 5m L , 置1m L具塞离心试管中, 加0.3m o l / L的三 氯乙酸

0 . 1m L ,离心

1 0m i n (

1 2

0 0 0r / m i n ) , 精密量取上清液置于试管中, 氮气吹干, 残渣用

1 5 %甲醇溶 解, 转入 1m L量瓶中, 加15%甲醇至刻度, 摇匀, 滤过, 作为给药供试品溶液. 志愿者未服用复方丹参 滴丸时, 取空白血清

0 . 5m L , 按上述方法制备, 即得空白血清供试品溶液.在未服用复方丹参滴丸药品 的空白血清

0 . 5m L中, 加入

0 . 5m L药品供试品溶液, 按上述方法制备, 即得空白血清加药供试品溶液.

2 .

3 .

3 药品供试品溶液的制备 将复方丹参滴丸

2 0粒, 研成粉末,

5 0 ℃干燥至恒重, 精密称取

2 5 0m g , 加15%甲醇

3 0m L , 超声处理

2 0m i n , 滤过, 减压蒸干, 残渣转溶至

1 0 0m L量瓶中, 以15%的甲醇定容.

2 .

4 待测物的 C S -H P L C -E S I -MS n 分析方法 分别取对照品溶液和供试品溶液, 自动进样器进样

1 0μ L , 5m i n切换, 选择负离子模式检测, 先用 全扫描( f u l l s c a n ) M S ( 相对碰撞能为零) 质谱方式获得待测物的准分子离子峰[ M- H ] - , 再提高相对碰 撞能, 利用 E S I -MS n 离子阱技术对准分子离子峰及其碎片离子进行多级质谱分析.

3 结果及讨论

3 .

1 丹参素对照品的 E S I 质谱裂解行为解析 根据获得丹参素对照品的总离子流图和一级全扫描质谱图, 对准分子离 子m/ z

1 9

6 .

6 ( M-H) 及图1碎片 离子 m/ z

1 9

6 . 6的 二级扫描 质谱图 F i g .

1 T h ee l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o nt a n - d e m m a s ss p e c t r a( E S I -MS

2 )o f f r a g m e n t m/ z

1 9

6 .

6 m/ z

3 9

4 .

6 , 分别进行二 级质谱分析, 逐渐增加电场强度, 发现在 M S

2 时, m/ z

1 9

6 . 6的碎 片离子中, m/ z

1 1

7 .

5 、 m/ z

1 5

2 . 3相对丰 度较大( 见图

1 ) .m/ z

3 9

4 . 6的主要碎片离子为 m/ z

1 9

6 .

6 . 说明 在负离子模式下, 丹参素较易结合为二聚物, 但提高电场能量后, 二聚体几乎不存在, 说明其不稳定性, 或者是由于基质( 溶剂) 、 电 场等不稳定因素造成丹参素的二聚物的生成.m/ z