95 ℃
2 min
1 变性 退火 延伸
95 ℃ 50-60 ℃
72 ℃
5 s
45 5 s( 见注 6)
25 s( 见注 7) 注意事项 6. 退火温度:退火温度应根据引物 Tm 值设定,通常是
50 -60 ℃为佳.不过,引物 Tm 值(和扩增温度)应该设计尽 可能地接近........