PDF《(Vero) 细胞介绍》

订购热线:4008-898-798 021-61725725 QQ:2881505690 监督

电话:13818158258 非洲绿猴肾细胞 (Vero) 细胞介绍 Vero 细胞株是日本千叶大学的 Y.

Yasumura 和Y. Kawakita 从正常成年非洲绿猴的 肾脏建株的.1964 年6月15 日B. Simizu 将其从千叶大学带到国立健康研究所(NIH) 国立过敏及传染病研究所热带病毒实验室时,己传至第

93 代. 细胞特性 1) 来源:非洲绿猴正常肾 2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长 3) 含量:>lxl06 个/mL 4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5) 规格:T25 瓶或者 lmL 冻存管包装 运输和保存:使用 T25 瓶充液发送活细胞.收到细胞后,请先在显微镜下检查细 胞生长状态,并将 T25 瓶置于培养箱约 6h 或过夜后,再次检查细胞状态.若状 态良好,可进行细胞后续处理操作,按照以下方式进行.若发现可疑污染物,请 及时与我们取得联系. 细胞用途:仅供科研使用. 细胞培养步骤 1) 培养基及培养冻存条件准备: 1. 准备 DMEM-H 培养基(DMEM-H,GIBCO,货号 12800017,添加 NaHC031.5g/L), 90%;

胎牛血清,10%.(DMEM 液体培养基:GIBCO,11995-065). 2. 培养条件:气相:空气,95%;

二氧化碳,5%.温度:37 摄氏度,培养箱 湿度为 70%-80%. 3. 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配.液氮储存. 2) 细胞处理: 复苏细胞:将含有 lmL 细胞悬液的冻存管在 37°C 水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL 培养基混合均匀.在1000RPM 条件下离心

4 分钟,弃去上清液,补加l-2mL 培养基后吹匀.然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入 lcm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜).第二天换液并检 查细胞密度. 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养. 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次. 力口 2m 丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于 37°C 培 订购热线:4008-898-798 021-61725725 QQ:2881505690 监督

电话:13818158258 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部 分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM 条件下离心

4 分钟,弃去上清液,补加 l-2mL 培养液后吹匀. 将细胞悬液按 1:

2 到1:

5 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者 瓶中. 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存.贴壁细胞冻存时,弃 去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约 lml 含血清的培养基后 加入冻存管中,再添加 1%DMSO 后进行冻存. 注意事项: 收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立 即与我们联系. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注 意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃.