PPT《实验 出凝血检查》

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3 4 5受检血浆(ml)- 0.01 0.05 0.09 0.10正常血浆(ml)0.10 0.09 0.05 0.01 -上述试管,置37℃ 1min,加0.025mol/LCaCl2 0.1ml,混匀后,记录血浆凝固时间. 注意事项: 所用血浆均为富含血小板血浆,分离出血浆后需在2h内检测完毕. 临床意义: RT最早作为内源性凝血系统相关凝血因子缺陷的筛选检查,但由于这个试验不如APTT,又容易受血小板数量和功能影响,目前只用来筛选是否存在病理性抗凝物质增多. 延长的复钙时间如被1/10量的正常血浆所纠正,则表示受检血浆中缺乏内源凝血因子;

如不被少量正常血浆纠正,提示存在异常抗凝物质. 血浆纤维蛋白原Fg 纤维蛋白原的测定方法众多,大体上分三大类:基于经加凝血酶后,形成纤维蛋白的方法,即可凝固蛋白法.物理、化学测定法.免疫学测定法. 目的和原理 为了解凝血途径最后环节的状况,排除纤维蛋白原减少、异常对凝血筛选试验的影响,了解纤溶活动度等可选择本试验. Clauss法以凝血酶作用于受检血浆中的纤维蛋白原,使其形成纤维蛋白,血液凝固. 纤维蛋白原的量与凝固时间成负相关,检测结果与参比血浆制成的标准曲线对比可得出纤维蛋白原的含量. 步骤: 将参比血浆用血浆稀释液作原倍、1:

2、1:

4、1:

8、1:16稀释5管.取稀释血浆0.2ml于小试管中,置37℃水浴预热2分钟,再加凝血酶溶液0.1ml,记录时间. 相关分析: 首先先清除内存.INV+AC,浓度(log或In)XD,YD输入(如不取对数,浓度直接输入XD,YD 读取值DATA输入;

全部数据输入完毕,按INV+9读出相关系数r.待测读数INV+log或In→读出相关浓度.如不取对数,待测读数直接INV+?x→读出相关浓度.最终浓度需根据样品稀释倍数乘积. ^ 标准曲线: t(s)2520151050 0.5

1 1.5

2 2.5C(g/L) 如血浆纤维蛋白原含量大于4 g/L时,应稀释血浆后重测,结果乘以稀释倍数.低于0.8 g/L时,需将原血浆改为1∶2或1∶5稀释,在标准曲线上查得结果后,除以5或除以2. 正常参考值:2~4mg/ml 临床意义: 纤维蛋白原增高除生理情况下的应激反应、妊娠后期外,主要出现感染、灼伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、多发性骨髓瘤、糖尿病、败血症等.纤维蛋白原减少见于DIC、原发性纤溶亢进症、重症肝炎、肝硬化和溶栓治疗时. 评价: Clauss方法测定的是纤维蛋白原功能,因此需纤维蛋白原结构正常,且有一定的含量,对低(无)纤维蛋白原血症和因此后纤维蛋白原血症应改用ELISA和RIA等免疫检测手段. 主要误差来源: 血浆稀释不准.凝血酶活性不足或失效.凝血酶一般应在低温保存,稀释后在塑料(聚乙烯)试管中,置4℃可保存活性24小时.测定终点观察不准确,尤其是纤维蛋白原含量高时,往往很快即凝固,手工法重复性较差,不易做准. 血浆凝血酶时间TT 原理 以标准凝血酶溶液加入受检血浆,使凝血酶裂解血浆中的纤维蛋白原,形成纤维蛋白,造成血浆凝固,此时所需时间为凝血酶时间. 方法: 0.1ml血浆+0.1mlTT试剂,37℃水浴中观察凝固时间. 正常参考值: 16~18S 评价: 时间大于正常参考值3秒:DIC、肝脏病变. TT时间缩短,并不代表高凝状态或DIC前期,是技术原因.如操作失误,组织液混入血标本,标本在4℃环境中放置过久. ........