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本公司专业供应Elisa试剂盒,品质保证,价格优惠,可免费提供代测服务,欢迎来电咨询! 大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的含量.

实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平.用纯化的大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP),再与HRP标记的神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色.TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)浓度. 试剂盒组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1*48 1*96 2-8℃保存 标准品:2700ng/L 0.5ml*1瓶0.5ml*1瓶2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml*1瓶1.5ml*1瓶2-8℃保存 酶标试剂

3 ml*1瓶6ml*1瓶2-8℃保存 样品稀释液

3 ml*1瓶6ml*1瓶2-8℃保存 显色剂A液3ml*1瓶6ml*1瓶2-8℃保存 显色剂B液3ml*1瓶6ml*1瓶2-8℃保存 终止液 3ml*1瓶6ml*1瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液 (20ml*20倍)*1瓶(20ml*30倍)*1瓶2-8℃保存 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分).仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心. 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分).仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心. 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分).仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心.胸腹水、脑脊液参照实行. 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集.离心20分钟左右(2000-3000转/分).仔细收集上清.检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右.通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份.离心20分钟左右(2000-3000转/分).仔细收集上清.保存过程中如有沉淀形成,应再次离心. 5. 组织标本:切割标本后,称取重量.加入一定量的PBS,PH7.4.用液氮迅速冷冻保存备用.标本融化后仍然保持2-8℃的温度.加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分.离心20分钟左右(2000-3000转/分).仔细收集上清.分装后一份待检测,其余冷冻备用. 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验.若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性. 操作步骤 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第

一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第

一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;

然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第

三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;

然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第