DOC《农业部办公厅文件》

或采取扑杀措施、血清学监测及紧急免疫情况下,最后一只免疫禽屠宰后6个月,经实施有效的疫情监测和血清学检测确认后,方可重新申请无高致病性禽流感区. 附件一: 样品采集与处理活禽病料应包括气管和泄殖腔拭子,最好是采集气管拭子.小珍禽用拭子取样易造成损伤,可采集新鲜粪便.死禽采集气管、脾、肺、肝、肾和脑等组织样品.将每群采集的10份棉拭子,放在同一容器内,混合为一个样品;

容器中放有含有抗菌素的pH值为7.0-7.4的PBS液.抗生素的选择视当地情况而定,组织和气管拭子悬液中应含有青霉素(2000IU/mL)、链霉素(2mg/mL),庆大霉素(50μg/mL),制霉菌素(1000IU/mL),但粪便和泄殖腔拭子所有的抗生素浓度应提高5倍.加入抗生素后pH值应调至7.0-7.4.若不加抗生素,可用细菌过滤器过滤除菌.粪便、研碎的组织用含抗生素的溶液配成10-20%(W/V)的悬液,冰浴放置1-2小时内样品应尽快处理,如来不及处理,可放在-70℃或以下保存,若放在4℃保存不能超过5天. 将混合样品用抗生素制成悬液,接种到9-11日龄鸡胚尿囊腔内,0.1mL/胚;

置于35-37℃孵育4-7天,检测死胚和所有到孵化末期鸡胚尿囊液的血凝活性.用浓缩病毒和所有A型流感病毒共有的核衣壳或基质抗原的抗血清作免疫扩散试验,能确诊A型流感病毒. 测定毒株对禽的致病力方法: 将感染鸡胚尿囊液用生理盐水1:10稀释,以0.1mL/羽的剂量翅静脉接种至少8只4-8周龄的易感鸡.每日观察鸡的死亡情况,连续观察10天.10天内如果死亡率高于75%,则认为该病毒毒株为高致病力. 附件二: 病原鉴定方法增殖A型流感病毒的较好方法是将其接种于无特........