PDF《孔雀石 绿及 其代谢 物在大 菱鲆 肌肉》

1 试 验材 料1.1试验时间、地点试验 于2007年 5月一9月在青 岛胶 南的嘉洋 高 新水产育苗养殖厂进行 .

1 .

2 试验 药物 孔雀石绿 , 天津市津宇精细化工有 限公司 . l I

3 试验动物健康大菱鲆 , 体重在

5 0

0 ~

2 5 g , 青岛嘉洋高新水产 育苗养殖厂提供 ,经检测确定不含孔雀石绿及其代谢 物隐色孔雀石绿后进行试验 .

1 .

4 试剂乙腈 , 色谱纯 , 德国 ME R C K;

乙酸胺 , 分析纯 , 北 京化 工厂 ;

甲酸 , 色谱纯 , 德国ME R C K ;

中性氧 化铝 柱, 美国Supelclean;

标准 品孔雀石绿( M G ) 和隐色孔雀 石绿( L MG ) , 内标氘代孔雀石 绿( D

5 ) 和 氘代隐色孔雀 第一作者简 介: 曲志娜 , 女,1970年出生 , 硕士 , 副研究员 , 研 究方 向为兽药残 留以及食 品安全. 通信地址 :

2 6

6 0

3 2 青岛市南京路

3 6

9 号中国动物卫生与 流行病学中心 .E - m a i l : q u z h i n a O h o t m a i

1 . c o m . 收稿 日期:

2 0

0 8 ―

0 3 ―

2 0 , 修回 日期:

2 0

0 8 ―

0 4 ―

1 3 . 维普资讯 http://www.cqvip.com ・

4 9 2・ Ch i ne s e Ag r i c u l t u r a l S c i e nc e Bul l e t i n Vo

1 .

2 4 No.

6 2

0 08 J u ne h t t p: / / www. c a s b. o r g . c n 石绿( D

6 ) , 纯度 >

9 8 %, 均购 自S i g ma 公司.

1 .

5 仪器超高效液 相色谱 一串联质谱 仪(UPLC/MS / MS ) , 美国Wa r t r e s 公司: 高速分散均质机 , F J 一200,上海标本 模型厂 ;

回旋振荡器 , H Y一5,国华仪器厂 ;

离心机 , He r ― a e u s MUL T I F UG E

3 L ― r ;

旋 转蒸 发仪 , 德国He i d o l p h ;

超声波清洗仪, KQ3

2 0

0 , 昆山市超声仪器有 限公司.

2 试验方法

2 . 1饲 养条 件 试验用鱼按

1 %鱼体重投喂空 白颗粒饵料 , 每日2次.水温

1 6 ±

2 ℃, 每 日换水饲养 .( 参考 Y / T

5 1

5 3 ―

2 0

0 2无公害食品大菱鲆养殖技术规范》 进行饲养) .

2 .

2 用 药及 采样2.2.1用 药 将试验用 大菱鲆 在盛有

8 0

0 n g / ml 孔雀石 绿溶液 的养鱼池 中药浴

1 h ,准确记录给药完成 时间, 然后将药浴后 的大 菱鲆置于不含孔雀 石绿 的养鱼池 中, 按2.1的饲养条件进行饲养 , 并按预定的采样方案 在给药后不同时刻剖杀取样 .

2 .

2 . 2采样 于停药后

0 、

1 、

2 、

4 、

6 、

1 2 h和

1、

2、

4、

6、

10、

20、

30、

40、

50、

60、

70、

80、95d将鱼迅速处死,用水清洗干净, 冷冻储存

1 h左右, 使大菱鲆 的血液凝固, 在取样 时不会 对肌 肉造成污染, 然后去皮取样, 编号, 一20℃保存备用.

2 .

3 样品处理及测定2.3.1药液 的配 制2.3.1.1800ng/ml 孔雀石绿溶液的配制 精确称取一定 量的孔雀石绿原粉用适量 的水溶解,然后倒入养鱼池 中, 加水配制成

8 0

0 n g / ml的孔雀石绿溶液 .当 日试验 前配制, 供试验鱼药浴使用.

2 .

3 .

1 . 2标准 品稀释液 乙腈 : 水=6:4(体积 L L ) .

2 .

3 .

1 . 3高效液相色谱流动相

0 .

1 % o 甲酸水 :

6 0 %乙腈 =

4 :

6 ( 体积 L L ) .

2 .

3 .

1 .

4 1

0 0

1 x g / ml 标准储备溶液 准确称取

1 0

1 x g孔雀石 绿, 隐色孔雀石绿, 氘代孔雀石绿和氘代隐色孔雀石绿, 分别用乙腈定容至

1 0

0 ml .配制隐色孔雀石绿时应使用 低反光的棕色容量瓶.室温避光储存, 有效期