PDF《孔雀石 绿及 其代谢 物在大 菱鲆 肌肉》

6 个月.

2 .

3 .

2 样 品处 理及测定

2 -

3 .

2 . 1添加 内标 准确称取

5 g样 品置于

5 0 ml 离心管 中, 添加100~1浓度 为lOOng/ml 的混合 内标溶液.相 当于每克鱼肉中含有内标氘代孔雀石绿和氘代隐色孔 雀石绿各

2 n g .

2 .

3 .

2 . 2提取 在2.3.2.1的样品中加入

1 l m l乙腈, 匀浆

3 0 s , 振荡

1 5 mi n ,

4 0

0 0 r / mi n离心

5 mi n .将上清液转移 至50ml 的 比色管 中.再 在原离心管 中加 入1lml 乙腈,重复提取 1次, 将上清液合并 , 乙腈 定容 至25ml , 充分摇匀备用 . 用5ml 乙腈活化 中性氧化铝柱 , 取5ml 提取液加入 已活化 的氧化铝柱中, 再加

4 ml 乙腈冲洗, 用鸡心瓶收集全部流出液 .于45~C旋转蒸发至近干 , 残 液用标准 品稀释液 定容至 l ml , 超声

2 r n i n , 将样 液 转移至

1 .

5 ml 的离心管中,

1 2

0 0

0 r / mi n高速离心

5 mi n , 上清液过

0 .

2 1 x m 水相膜, 供UP L C / MS / MS测定.

2 -

3 .

2 - 3液相色谱一 串联质谱测定条件 色谱柱 : Wa t r e s Ac q u i t y C1 8粒度

1 .

7 1 x m,

2 .

1 mmx

5 0 mm;

柱温:35~C. 进样量 :

1 0

1 x l . 离子源 : 电喷雾 E S I , 正离子 . 扫描方式: 多反应监测 MRM.雾化气、 窗帘气、 辅助加热气、 碰撞 气均为高纯液氮 .监测离子对 : 孔雀石绿 m/ z

3 2

9 /

3 1

3 ( 定量离子) ,

3 2

9 /

2 0

8 ;

隐色孔雀石绿 m/ z

3 3

1 /

3 1

6 ( 定量 离子) ,

3 3

1 /

2 3

9 ;

氘代孔雀石绿 m/ z

3 3

4 /

3 1

8 ( 定量离子) ;

氘代隐色孔雀石绿 m / z

3 3

7 /

3 2

2 ( 定量离子) .

2 .

4 标准曲线 的制备 及线性范围、检测限、 精 密度 和回收率试验2.4.1标准曲线的制备及线性范围 取适量的孔雀石绿 和隐色孔雀石绿标准储备液, 添加一浓度的内标溶液, 稀释成

2 ,

1 0 ,

5 0 ,

1 0

0 ,

2 0

0 ,

3 0

0 n g / ml 的标准工作液 , 按2.3.2.3的测定条件进行测定,以内标与外标的峰面积 之 比为纵坐标 , 浓度为横坐标做标准 曲线, 分别求 出回 归方程和相关系数.

2 .

4 . 2检测限、 回收率和精 密度试验 取空 白鱼 肉样品, 加入一定量的孔雀石绿和隐色孔雀石绿标准溶液 , 该 试验为三水平 四重复试验 , 样品按

2 .

2 . 3处理方法处理 后, 用UPLC/MS / MS测定, 分别计算大菱鲆肌 肉样品 中孔雀石绿和 隐色孔雀石绿含量测定 的回收率和精密 度.以引起 3倍基线噪音 的药量为最低检测限.

2 .

5 数据处理2.5.1孔雀石绿及 隐色 孔雀石绿在 大菱 鲆肌肉........