PDF《ICS 11.020》

4 A A 附录A(资料性附录) 病原生物学 A.1 分类 巴贝虫(Babesia spp.)属于顶复门(Apicomplexa)、孢子虫纲(Sporozoa)、梨形虫亚纲 (Piroplasmasina)、梨形虫目(Piroplasmida)、巴贝虫科(Babesiidae)的巴贝虫属(Babesia).目前 已鉴定的有100多种巴贝虫,可以感染牛、马、羊、犬等多种哺乳动物和鸟类.在100多种巴贝虫中,既 往已知可以感染人的巴贝虫种类主要有:田鼠巴贝虫(B. microti)、分歧巴贝虫(B. divergens)、邓肯巴 贝虫(B. duncani,也称为WA1)和猎户巴贝虫(B. venatorum,也被称为EU1)等.不同巴贝虫虫种引 起人体临床症状的比较见表A.1. A.2 分布 本病呈地方性流行. 在美国,巴贝虫病病例主要发现于马萨诸赛岛、纽约州、康涅狄格岛、加利福尼亚州以及罗得岛. 在欧洲,法国、葡萄牙、意大利、波兰、挪威等地均有人巴贝虫病病例发生.另外,在埃及、墨西哥、 澳大利亚、日本、韩国、巴基斯坦及南非也均有人巴贝虫病病例报道. 在我国云南、河南、新疆、山东、陕西、浙江、江苏、广西、福建及台湾、香港地区等地均有人巴 贝虫病病例报道. 表A.1 不同巴贝虫虫种引起人体临床症状的比较 虫种 地理分布 媒介名称 潜伏期 临床特征 其他 田鼠巴贝虫 (B. microti) 欧洲、 美国、 日本、 中国、 埃及等 肩突硬蜱、 卵形硬蜱、 全沟硬蜱、 丹敏硬蜱 1周~6周,甚至3 个月以上 大多数患者症状比较轻微,只出现一过 性的发热症状;

而重症患者出现疟疾样 症状,包括发热、寒战、肌肉疼痛、贫血、无力、肝脾肿大、溶血性贫血等 一般以50岁以上 的老人易感 分歧巴贝虫 (B. divergens) 欧洲 篦子硬蜱 1周~3周 突然起病、血红蛋白尿、黄疸、休克样 表现 脾脏切除和免疫 缺陷者易感 邓肯巴贝虫 (B. duncani) 欧洲、美国 等 丹敏硬蜱、 肩突硬蜱 3周~2个月 发热、寒战、肌肉疼痛、贫血、无力、 肝脾肿大、溶血性贫血,持续数周或更 长 脾脏切除患者易 感;

易输血传播 猎户巴贝虫 (B. venatorum) 欧洲、中国 等 蓖子硬蜱、 卵形硬蜱 不明确 大多数患者症状比较轻微,只出现一过 性的发热症状;

严重者表现贫血、血红 蛋白尿、黄疸等症状 免疫功能低下者 或者脾切除患者 易感 WS/T 633―2018

5 B B 附录B(资料性附录) 试剂配制 B.1 试剂的配制 B.1.1 Tris-乙酸电泳缓冲液(Tris- acetic acid buffer solution,TAE)的配制 50* TAE 的配制: 三 (羟甲基) 氨基甲烷 (Tris 碱)

242 g, 冰乙酸 57.1 mL, 0.5 mol/L EDTA( pH 8.0)

100 mL,加去离子灭菌水定容至

1 000 mL,混匀 4℃保存备用. B.1.2 1* TAE 使用液的配制 50* TAE

20 mL加蒸馏水定容至

1 000 mL,混匀备用. B.1.3 1.0%琼脂糖凝胶的配制 琼脂糖 1.0 g 加1* TAE 定容至

100 mL,微波炉加热完全融化后,溶液冷却至

60 ℃,加10 mg/mL 溴化乙锭替代物

5 ?L(终浓度0.5 ?g/mL),轻轻混匀后,制备凝胶. B.1.4 6*加样缓冲液的配制 溴酚蓝 0.25 g,蔗糖

40 g,加蒸馏水至

100 mL.置于

4 ℃保存备用. B.2 DNA的提取 取100 ?L血液样品,用商品化的全血样品DNA提取试剂盒提取基因组DNA,操作步骤按试剂盒说 明书进行. WS/T 633―2018

6 C C 附录C(规范性附录) PCR 实验、测序结果分析及标准参考序列 C.1 PCR扩增引物序列 巴贝虫虫种鉴定引物见表C.1. 表C.1 巴贝虫虫种鉴定引物 引物 引物名称 引物序列 a 片段大小 b 参考文献 18S rRNA 外侧引物 Bab