DOC《附件1》

附件1 食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁 和蒂巴因的测定 BJS

201802 1 范围 本方法规定了食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的液相色谱-串联质谱测定方法.

本方法适用于固体食品(香辛料、调味粉、固态火锅底料、鸡精等固体复合调味料、肉制品等)、半固体食品(沙茶酱、辣椒酱等酱料、半固体麻辣烫底料、半固体火锅底料、其他半固体复合调味料)和液体食品(调味油、辣椒油等液体调味料、火锅汤料、麻辣烫汤料、其他食用汤料)中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的定量测定.

2 原理 样品用水或盐酸溶液分散均匀,用乙腈提取后,经盐析处理,离心,取上清液用液相色谱-串联质谱仪检测.吗啡和可待因用内标法定量,罂粟碱、那可丁和蒂巴因用外标法定量.

3 试剂与材料 除另有规定外,本方法中所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T 6682规定的一级水. 3.1 试剂 3.1.1甲醇(CH3OH):色谱纯. 3.1.2乙腈(CH3CN):色谱纯. 3.1.3甲酸(HCOOH):色谱纯. 3.1.4盐酸(HCl). 3.1.5甲酸铵(HCOONH4):色谱纯. 3.1.6无水醋酸钠(CH3COONa). 3.1.7无水硫酸镁(MgSO4). 3.2 试剂配制 3.2.1盐酸溶液(0.1 mol/L):量取盐酸(3.1.4)9 mL,加水至1000 mL,摇匀备用. 3.2.2甲酸铵溶液(10 mmol/L):称取甲酸铵(3.1.5)0.63 g(精确至0.01 g),加少量水溶解后,定容至1000 mL,混匀后备用. 3.2.3甲酸甲醇溶液(0.5%):准确吸取甲酸(3.1.3)0.5 mL,置于100 mL容量瓶中,用甲醇稀释并定容至刻度,摇匀备用. 3.2.4甲酸乙腈溶液(0.1%):量取甲酸(3.1.3)1 mL,用乙腈(3.1.2)稀释至1000 mL,摇匀,过滤. 3.2.5含0.1 %甲酸的10 mmol/L甲酸铵溶液:量取甲酸(3.1.3)1 mL,加甲酸铵溶液(3.2.2)稀释并定容至1000 mL,摇匀,过滤. 3.3 标准品 3.3.1罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因标准品:纯度不低于98%.中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量详见表1. 表1 标准品基本信息 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子量 罂粟碱 Papaverine 58-74-2 C20H21NO4 339.38 吗啡 Morphine 57-27-2 C17H19NO3 285.34 那可丁 Noscapine 128-62-1 C22H23NO7 413.42 可待因 Codeine 76-57-3 C18H21NO3 299.36 蒂巴因 Thebaine 115-37-7 C19H21NO3 311.37 3.3.2吗啡-D3同位素溶液(C17H16D3NO3):浓度为1.0 mg/mL.18℃密封避光保存,有效期1年. 3.3.3可待因-D3同位素溶液(C18H18 D3NO3):浓度1.0 mg/mL.18℃密封避光保存,有效期1年. 3.4 标准溶液配制 3.4.1标准储备液(1.0 mg/mL):分别精密称取罂粟碱、那可丁、蒂巴因、吗啡和可待因标准品各10 mg(精确至0.01mg)至小烧杯中,加少量甲酸甲醇溶液(3.2.3)溶解,溶液定量移入10 mL容量瓶中,用甲酸甲醇溶液(3.2.3)稀释至刻度,摇匀,配制成浓度均为1.0 mg/mL的标准储备液.此溶液密封后18℃避光保存,有效期 1年. 3.4.2混合标准中间溶液(1):准确吸取浓度为1.0 mg/mL的罂粟碱、那可丁、蒂巴因标准储备液(3.4.1)各100 ?L和浓度为1.0 mg/mL的吗啡、可待因标准储备溶液(3.4.1)各5 mL于同一个100 mL容量瓶中,用乙腈(3.1.2)定容至刻度,摇匀,即得含罂粟碱、那可丁、蒂巴因浓度为1.0 ?g/mL和吗啡、可待因浓度为50 ?g/mL的混合标准品溶液.此溶液密封后4℃避光保存,有效期 6个月. 3.4.3混合标准中间溶液(2):准确吸取混合标准中间溶液(1)(3.4.2)1.0 mL于10 mL容量瓶中,用乙腈(3.1.2)定容至刻度,摇匀,即得含罂粟碱、那可丁、蒂巴因浓度为0.10 ?g/mL和吗啡、可待因浓度为5.0 ?g/mL的混合标准品溶液.此溶液密封后4℃避光保存,有效期 6个月. 3.4.4同位素内标工作溶液(5.0 ?g/mL):分别精密吸取吗啡-D3同位素溶液(3.3.2)和可待因-D3同位素溶液(3.3.3)各1.0 mL,置200 mL容量瓶中,用水定容至刻度,配制成吗啡-D