DOC《《贵州省食品安全地方标准植物性农产品中赤霉素残留量的测...》

d) 辅助气流速(GS2):40 Psi;

e) 离子源温度(TEM):450 (C;

f) 监测离子对、碰撞电压(CE)、去簇电压(DP)、碰撞室入口电压(EP)、碰撞室出口电压(CXP)如表5所示. 表5 赤霉素碎片离子信息 化合物 母离子 (Q1) 子离子 (Q3) CE(V) DP(V) EP(V) CXP(V) 赤霉素 -345.2 -143.1* -40 -90

10 15 -221.2 -30 -90

10 15 注:*为定量离子 3.6 色谱条件的选择 3.6.1流动相梯度 表6 梯度洗脱程序表 时间(min)

5 mmol/L乙酸铵-0.5%乙酸水 溶液(流动相A)

5 mmol/L乙酸铵-0.5%乙酸甲醇溶液(流动相B)

0 85

15 1

60 40 3.5

60 40

6 50

50 10

45 55

15 5

95 20

5 95

23 85

15 28

85 15 a)柱温:40 ℃;

b)流速:0.2 mL/min;

c)进样体积:5μL. 3.6.2流动相酸度的优化选择 本研究比较了5个不同乙酸浓度的流动相进行等度洗脱的效果,当流动相中不含乙酸的时候,赤霉素出现前延峰.随着流动相中乙酸浓度的增大,流动相的pH也随之减小,赤霉素色谱峰的前延现象有所改善.当流动相中乙酸含量为0.1%时,赤霉素的峰型对称性得到了很大改善.综合考虑,本实验选择乙酸为0.5%. 3.6.3缓冲盐浓度的优化选择 本研究比较了4种不同浓度的乙酸铵对目标物质分离测定效果的影响.随着流动相中乙酸铵浓度的增大,保留时间发生了明显的变化.鉴于灵敏度和分离度的影响,综合考虑,本实验选择乙酸铵浓度为为5mM. 3.7准确度 为考察方法的准确度,我们在不同的蔬菜水果等基质中添加不同浓度的目标物进行回收率的试验.欧盟规定赤霉素的残留限量为5mg/kg.在本实验中选择苹果、葡萄、黄瓜等7种蔬菜水果及茶叶和茶青进行添加回收率试验,具体结果见表5. 图1 不同乙酸浓度下的液相色谱-质谱(LC-MS/MS)色谱图 表6 不同样品基质中目标物添加回收率结果(%) 赤霉素(GA3) 样品 添加水平(mg/kg) 重复1 重复2 重复3 平均 相对标准偏差% 桔子 0.1 88.2 99.8

100 96 7.03 0.2 111.1 108.8 114.7

112 2.66 0.4 85.3 93.5 90.5 89.8 4.62 桔子皮 0.2 98.6 103.6 99.6

101 2.63 0.4

82 100

99 93.7 10.8 0.8 92.8 92.4 90.6 91.9 1.27 苹果 0.1 89.1 85.3 84.2 86.2 2.98 0.2 110.1 113.5 113.8

112 1.83 0.4 84.5 87.4 89.8 87.2 3.04 葡萄 0.1 85.1 89.9 93.6 89.5 4.76 0.2 80.9 87.5 87.9 85.4 4.6 0.4 96.7 98.9 99.5 98.4 1.49 西瓜 0.1 109.7 111.5 112.9

111 1.44 0.2 98.8 102.3 100.5

101 1.74 0.4 80.3 85.7 88.2 84.7 4.76 番茄 0.1 76.3 85.5 90.5 84.1 8.56 0.2 94.8 101.5 104.2

100 4.83 0.4

90 101.3

102 97.8 6.88 黄瓜 0.1 93.2 88.2 90.1 90.5 2.78 0.2 90.9 93.1 95.6 93.2 2.52 0.4 98.7 105.2 109.8

105 5.33 油菜 0.1 90.3 95.3 93.5

93 2.72 0.2 88.3 85.1 89.6 87.7 2.64 0.4 83.1 87.3 89.7 86.7 3.85 茶叶 0.1 95.2 91.1 93.2 93.2 2.05 0.2 82.3 76.3 82.3 80.3 3.46 0.4 91.4 86.4 88.2 88.7 2.53 茶青 0.1 90.9 93.9 91.3 92.0 1.63 0.2 82.3 72.3 82.6 79.1 5.86 0.4 80.1 88.1 92.5 86.9 6.29 3.8精密度 3.8.1重复性 在本实验中,在同一实验室,由同一操作者使用相同仪器设备,按相同的前处理方法和测试方法,在短时间内对农产品样品中的赤霉素进行了6次测定,重复性结果见表6-10,相对标准偏差在0.04 %-4.55%范围内,符合重复性试验对相对标准偏差的要求. 表7 重复性结果-赤霉素 样品 6次重复测定结果 ?g/kg 平均 ?g/kg 标准 偏差 相对标准 偏差 RSD(%)

1 2

3 4

5 6 番茄 159.28 158.68 159.25 155.49 158.53 157.01 158.04 1.49 0.95 黄瓜 185.64 189.48 188.06 188.76 186.9 187.76 187.76 1.36 0.73 油菜 195.23 196.42 188.57 190.80 190.86 192.41 192.38 2.95 1.54 苹果 147.09 139.05 142.75 143.56 143.45 146.23 143.68 2.84 1.98 葡萄 130.66 132.08 133.48 134.33 135.85 131.86 133.04 1.88 1.41 西瓜 147.98 145.26 144.22 146.04 148.98 145.46 146.32 1.79 1.22 桔子 161.74 162.08 160.56 160.74 160.86 163.09 161.51 0.978 0.61 桔子皮 165.23 166.12 164.75 164.87 165.42 166.04 165.41 0.576 0.35 茶青 200.01 202.02 203.05 201.25 203.21 201.45 202.37 1.58 0.07 茶叶 202.76 201.13 201.57 201.89 203.24 202.19 202.13 0.78 0.04 3.8.2再现性 在本实验中,我们选择了不同部委下属的5家实验室,即农业部蔬菜品质监督检验测试中心、中国检科学院综合检测中心、农业部蜂产品质量监督检验测试中心、中国科学院生态环境研究中心环境水质学室及北京市疾病预防控制中心,分别记为实验室