PDF《针刺对阿尔茨海默氏病 杂粤酝孕愿 小鼠学习记忆能力及》

窑实验研究窑 收稿日期院圆园员源原园员原圆员 基金项目院浙江省教育厅项目袁浙江省野重中之重冶针灸学科项目渊再圆园员猿圆远怨缘远冤 作者简介院张全爱渊员怨苑远原冤袁男袁副主任中医师袁医学博士遥 研究方向院针灸作用与中枢神经网络调控研究遥 针刺对阿尔茨海默氏病 杂粤酝孕愿 小鼠学习记忆能力及 海马区胰岛素受体 皂砸晕粤 表达的影响 张全爱员 袁孙晓慧圆 袁高摇 宏猿 袁林家驹猿 袁方摇 莉猿 袁李邦伟猿 袁李星凌猿 渊员援 浙江中医药大学第三临床医学院袁浙江摇 杭州摇 猿员园园缘猿曰 圆援 青岛市技术开发区第一人民医院袁山东摇 青岛摇 圆远远园园园曰 猿援 浙江中医药大学附属第三医院袁浙江摇 杭州摇 猿员园园园缘冤 摘要院目的摇 观察针刺足三里尧百会穴对阿尔茨海默氏病渊粤阅冤转基因快速老化 杂粤酝孕愿 小鼠的学习记忆 能力及海马区胰岛素受体渊陨灶泽砸冤皂砸晕粤 表达的影响袁并探讨其作用机制遥 方法摇 用 酝燥则则蚤泽 水迷宫进行筛选袁 将符合 粤阅 模型标准的 杂粤酝孕愿 小鼠随机分为模型组尧针刺治疗组渊简称为针刺组冤袁每组 员园 只袁并随机选取 同源尧同龄的 员园 只 杂粤酝砸员 小鼠作为正常对照组遥 针刺组针刺小鼠足三里尧百会穴袁留针 猿园 皂蚤灶袁每日 员 次袁 员园 凿为员个疗程袁疗程之间间隔 圆 凿袁连续治疗 猿 个疗程遥 通过水迷宫隐蔽平台试验尧空间探索试验判断小鼠 的学习记忆能力袁并通过逆转录聚合酶链反应渊 砸栽鄄孕悦砸冤 检测左侧海马区 陨灶泽砸 皂砸晕粤 的相对表达量遥 结果摇 隐蔽平台试验中袁模型组平均逃避潜伏期渊孕蕴蕴冤较正常对照组显著延长袁有效区停留时间显著缩短 渊孕约园援 园缘冤曰针刺组 孕蕴蕴 较模型组显著缩短袁有效区停留时间显著延长渊孕约园援 园缘冤曰平台停留次数 猿 组间比较 差异无统计意义渊孕跃园援 园缘冤遥 空间探索试验中袁模型组原平台象限百分比较正常对照组显著降低渊孕约园援 园员冤袁 跨越次数显著增高渊孕约园援 园缘冤曰针刺组原平台象限百分比较模型组显著升高渊孕约园援 园员冤袁跨越次数显著减少 渊孕约园援 园缘冤遥 模型组左侧海马区 陨灶泽砸 皂砸晕粤 相对表达量较正常对照组显著降低渊孕约园援 园缘冤袁针刺组较模型组 显著升高渊孕约园援 园缘冤遥 结论摇 针刺足三里尧百会穴可通过上调海马区 陨灶泽砸 皂砸晕粤 的表达袁从而提高 粤阅 杂粤酝孕愿 小鼠的学习记忆能力遥 摇摇关键词院针刺疗法曰阿尔茨海默氏病曰杂粤酝孕愿 小鼠曰学习记忆能力曰胰岛素受体 皂砸晕粤曰实验研究 中图分类号院砸圆愿缘援 缘摇 文献标志码院月摇 文章编号院员园园猿原愿源缘园渊圆园员源冤园猿原园园园员原园源 摇摇阿尔茨海默氏病渊葬造扎澡藻蚤皂藻则 凿蚤泽藻葬泽藻袁粤阅冤是一种 复杂的神经元退行性疾病袁主要表现为学习记忆能 力减退和认知障碍袁如注意力尧语言功能尧视觉空间 加工功能降低等咱员暂 遥 本研究以胰岛素受体渊蚤灶泽怎造蚤灶 则藻糟藻责贼燥则袁陨灶泽砸冤为切入点袁观察针刺百会尧足三里穴 对 粤阅 转基因快速老化 杂粤酝孕愿 小鼠海马区 陨灶泽砸 皂砸晕粤 表达的影响袁从而揭示针刺治疗提高 粤阅 模 型小鼠学习记忆能力的作用机制遥 员摇 实验材料 员援 员摇 实验动物 源 月龄转基因快速老化型 杂粤酝孕愿 小鼠 渊 杂孕云 级袁雄性冤猿园 只袁同源尧同龄正常老化 杂粤酝砸员 小鼠 员缘 只渊杂孕云 级袁雄性冤袁由浙江中医药大学实验动物 中心提供袁动物合格证号院杂再载运渊浙冤圆园员猿原园园员缘遥 员援 圆摇 仪器与试剂 载砸原载酝员园员 型 酝燥则则蚤泽 水迷宫袁上海欣软信息 科技有限公司曰华佗牌针灸针袁长度 员缘 皂皂袁直径 园援 圆缘 皂皂袁批号 圆园员猿园员园圆曰陨灶泽砸 逆转录聚合酶链反应 渊砸栽鄄孕悦砸冤试剂盒袁上海蓝基生物科技有限公司袁批 号 耘园苑灾员猿园圆遥 圆摇 实验方法 圆援 员摇 粤阅 模型小鼠筛选及分组 圆援 员援 员摇 粤阅 模型小鼠筛选摇 将 杂粤酝砸员 小鼠和转基 因快速老化型 杂粤酝孕愿 小鼠同时进行 酝燥则则蚤泽 水迷宫 行为测试遥 每天训练 源 次袁连续 远凿后袁参照文献 咱员暂 标准并进行改进袁 以 杂粤酝砸员 小鼠作为对照袁 要员要第猿员 卷第猿期圆园员源 年远月摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇甘肃中医学院学报允郾 郧粤晕杂哉 悦韵蕴蕴耘郧耘 韵云 栽悦酝 摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇灾燥造郾 猿员摇 晕燥郾 猿 允怎灶援 圆园员源 杂粤酝孕愿 小鼠的平均逃避潜伏期逸杂粤酝砸员 小鼠平均 逃避潜伏期均数依圆 倍标准差作为 粤阅 模型小鼠袁纳 入实验分组遥 圆援 员援 圆摇 分组摇 将符合以上 粤阅 模型标准的 杂粤酝孕愿 小鼠随机选取 圆园 只袁采用随机数字表法分为 圆 组袁 即模型组尧针刺治疗组渊简称针刺组冤袁每组 员园 只遥 在同源尧同龄的健康正常老化的 杂粤酝砸员 小鼠中随 机选取 员园 只作为对照组遥 圆援 圆摇 选穴及治疗方法 针刺组选取足三里尧百会穴渊 参考叶 实验针灸 学曳叶中国兽医针灸学曳冤袁用自制小鼠固定架固定袁 以 园援 缘 寸毫针平刺刺入百会穴 员耀圆皂皂袁直刺足三 里穴 猿 耀缘 皂皂袁左右捻转 员 皂蚤灶袁留针 猿园 皂蚤灶袁每日 员 次袁员园 凿为员个疗程袁疗程之间间隔 圆 凿袁共治疗 猿个疗程遥 正常对照组及模型组以同样方式固定袁但不 做针刺治疗遥 圆援 猿摇 学习记忆能力测试及 陨灶泽砸 皂砸晕粤 检测 圆援 猿援 员摇 学习记忆能力测试摇 员冤 隐蔽平台试验院针 刺治疗结束后袁对各组动物进行隐蔽平台试验遥 试 验时平台位置与模型筛选时位置一样袁置于东北象 限中央袁平台中点离池壁 圆圆援 缘 糟皂袁在平台对侧选 圆 个与之距离相等的点作为入水点袁训练时将小鼠面 朝池壁轻轻放入水中袁记录逃避潜伏期渊孕蕴蕴冤 以及 有效区逗留时间渊泽冤尧平台停留次数袁每天在 圆 个入 水点各训练 员 次袁以 圆次孕蕴蕴 的算术均值作为这一 天的成绩进行统计分析遥 圆冤空间探索试验院隐蔽平 台试验结束 圆源 澡 后袁撤除平台袁然后任选一相同入 水点将小鼠放入水中袁记录小鼠在 远园 泽 内的游泳路 径袁对小鼠在原平台象限的停留时间渊泽冤 及搜索次 数进行统计分析遥 圆援 猿援 圆摇 陨灶泽砸 皂砸晕粤 检测摇 各组小鼠进行 酝燥则则蚤泽 水 迷宫测试后袁麻醉各组小鼠袁颈椎脱臼处死袁在冰上 剥离各组小鼠的左侧海马组织袁放入液氮中保存遥 然后进行海马组织总 皂砸晕粤 的提取袁完成 陨灶泽砸 皂砸鄄 晕粤 砸栽鄄孕悦砸 检测袁具体步骤参照 砸栽鄄孕悦砸 试剂盒说 明书进行遥 圆援 源摇 统计方法 所有数据均采用 杂孕杂杂 员猿援 园 统计软件进行统计 学处理袁以 曾依泽 表示袁各组间比较采用单因素方差分 析袁其中方差齐者采用 蕴杂阅 法袁方差不齐者采用 阅怎灶灶藻贼贼爷泽 栽猿 检验遥 猿摇 结果 猿援 员摇 针刺足三里尧百会穴对 杂粤酝孕愿 小鼠学习记忆 能力的影响 由表 员 可见袁隐蔽平台试验中袁模型组平均 孕蕴蕴 较对照组显著延长袁有效区停留时间显著缩短渊孕约 园援 园缘冤曰针刺组 孕蕴蕴 较模型组显著缩短袁有效区停留 时间显著延长渊孕约园援 园缘冤曰平台停留次数 猿 组间比较 差异无统计意义渊孕跃园援 园缘冤遥 空间探索试验中袁模型 组原平台象限百分比较正常对照组显著降低渊 孕约 园援 园员冤袁跨越次数显著增高渊孕约园援 园缘冤曰针刺组原平 台象限百分比较模型组显著升高渊孕约园援 园员冤袁跨越次 数显著减少渊孕约园援 园缘冤遥 表 员摇 各组 杂粤酝孕愿 小鼠隐蔽平台试验和空间探索试验各项指标比较渊 曾依泽冤 组别 灶 隐蔽平台试验 逃避潜伏期辕 泽 有效区停留时间 辕泽平台停留次数辕 次 空间探索试验 原平台象限百分比辕 豫 跨越次数辕 次 对照组 员园 圆苑援 苑源依园援 员苑 猿援 圆愿依园援 圆远 园援 苑园依园援 员猿 员援 员苑依园援 园圆 园援 圆圆依园援 园愿 模型组 愿 源员援 苑源依园援 员圆鄢 员援 远远依园援 源圆鄢 园援 远远依园援 园远 园援 园远依园援 园怨鄢 鄢 员援 圆猿依园援 员猿鄢 针刺组 员园 圆缘援 远远依园援 员员吟 猿援 远源依园援 圆缘吟 园援 源缘依园援 员远 员援 员缘依园援 园苑吟吟 园援 圆猿依园援 员猿吟 摇摇注院模型组 圆 只小鼠死亡袁其中因腹泻死亡 员 只袁原因不明 员 只遥 与对照组比较鄢孕约园援 园缘袁鄢 鄢孕约园援 园员曰与模型组比较 吟孕约园援 园缘袁吟吟孕约园援 园员遥 猿援 圆摇 针刺足三里尧百会穴对 杂粤酝孕愿 小鼠 陨灶泽砸 皂砸鄄 晕粤 相对表达量的影响 由表 圆 可以看出袁模型组 陨灶泽砸 皂砸晕粤 相对表达 量较对照组显著降低渊孕约园援 园缘冤袁针刺组较模型组显 著升高渊孕约园援 园缘冤遥 猿援 猿摇 各组 陨灶泽砸 皂砸晕粤 产物表达电泳图 由图 员 可以粗略看出袁针刺组电泳表达产物较 模型组增强袁和对照组比较袁差异无统计意义遥 要圆要第猿员 卷第猿期圆园员源 年远月摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇甘肃中医学院学报允郾 郧粤晕杂哉 悦韵蕴蕴耘郧耘 韵云 栽悦酝 摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇灾燥造郾 猿员摇 晕燥郾 猿 允怎灶援 圆园员源 表 圆摇 各组 杂粤酝孕愿 小鼠左侧海马区 陨灶泽砸 皂砸晕粤 相对 表达量的比较渊 曾依泽冤 组别 灶 陨灶泽砸 皂砸晕粤 对照组 员园 园援 源愿依园援 园远 模型组 愿 园援 员怨依园援 愿园鄢 针刺组 员园 园援 源源依园援 圆员吟 摇摇注院与对照组比较鄢孕约园援 园缘袁与模型组比较吟孕约园援 园缘遥 酝为皂葬噪藻援 员原猿 跑道曰员 正常对照组曰 圆 模型组曰猿 针刺组 图 员摇 陨灶泽砸 皂砸晕粤 产物表达电泳图 源摇 讨论 临床和动物实验均已证实院针刺治疗可以提高 机体的认知功能袁提高记忆袁保持学习及再学习能 力咱圆暂 遥 临床研究还发现袁针灸百会穴对健康学生短 时学习记忆有良好的影响作用咱猿暂 袁我们在临床中针 刺百会配足三里抗衰老的治疗中也取得了较好的疗 效遥 中医学认为袁百会居巅顶正中袁为督脉尧足太阳 膀胱经尧足阳明胃经尧手少阳三焦经和足厥阴肝经的 交会穴遥 叶黄帝明堂灸经曳 记载百会主野少心力袁忘 前失后袁心神恍惚冶袁叶针灸大成曳 记载野百会主噎噎 惊悸袁健忘冶遥 学习记忆能力的减退主要是肾经亏 损尧髓海空虚尧不能濡养神明所致遥 足三里为足阳明 胃经合穴袁针刺足三里可强健脾胃袁增强免疫袁以后 天补益先天袁使机体强健袁精神饱满袁促进认知功能 的改善遥 本研究采用的转基因快速老化 杂粤酝孕愿 小鼠已 被广泛应用于研究年龄相关的学习记忆功能缺.

...............