PDF《ICS 11.020》

4 以男性500万个/微升血、 女性按450万个/微升血计算. 薄血膜的疟原虫计数法适用于疟原虫密度很高 时(每微升血中疟原虫数>

16000个)的疟原虫计数. 5.5 血涂片保存 用吸水纸吸去已检血涂片血膜表面的香柏油或专用浸油, 在血膜上滴加2滴~3滴二甲苯, 然后用吸 水纸吸干(专用浸油无需用二甲苯清洗,可直接用吸水纸吸干).置血涂片于玻片盒内,避光、干燥和 阴凉保存,以备复核. WS/T 569―2017

5 A A 附录A(资料性附录) 厚血膜和薄血膜血涂片制作示意图 厚血膜和薄血膜血涂片制作示意图见图A.1. 图A.1厚血膜和薄血膜血涂片制作示意图 WS/T 569―2017

6 B B 附录B(资料性附录) 吉氏染液的配制 B.1 吉氏染色原液配制 吉氏粉5.0g,甲醇250mL,甘油250mL. 将吉氏粉置于研钵中,加入少量甘油充分研磨,然后边加边磨,至甘油加完为止,倒入500mL有塞 深色玻璃瓶中.在研钵中加入少量甲醇,洗掉剩余部分,倒入瓶内,再次加甲醇,洗后再倒入瓶中,至 甲醇洗净研钵中甘油为止.塞紧瓶塞,置室温内,每天用力摇动溶液5min,3d后即可使用. 注意事项:将瓶塞塞紧,以避免蒸发和高湿造成的氧化;

储存在深色的玻璃瓶中,避免阳光直射,储存 时间越久染色效果越佳.根据日常的需求,用干燥吸管吸取少量的染色原液到密闭的分装瓶中(大约 25mL) .切勿向原液中加入水. B.2 pH 7.2 磷酸盐缓冲液(PBS)的配制 先制备好两种贮备溶液. 溶液I为9.5g无水磷酸氢二钠加蒸馏水至1000mL, 溶液II为9.07g磷酸二氢 钾加蒸馏水至1000 mL.制备时将磷酸盐置于容量瓶中,加入部分蒸馏水摇匀使溶解后,再加入蒸馏水 稀释至1000 mL,充分摇匀,塞紧备用.临用时,取73 mL溶液I和27 mL溶液II,倒入1000 mL容量瓶中, 加入部分蒸馏水, 混合摇匀后, 再加入蒸馏水稀释至1000mL的刻度, 塞紧瓶塞反复摇匀后, 即配制成pH7.2 的缓冲溶液. B.3 吉氏染色工作液的配制 B.3.1 3%吉氏染色工作液的配制 在97mLpH 7.2 磷酸盐缓冲液中加入3 mL吉氏染色原液并混匀. B.3.2 10%吉氏染色工作液的配制 在9mLpH 7.2 磷酸盐缓冲液中加入1 mL吉氏染色原液并混匀. B.3.3 2%吉氏染色工作液的配制 在98mLpH 7.2 磷酸盐缓冲液中加入2 mL吉氏染色原液并混匀. B.3.4 注意事项 吸取吉氏染色原液时切勿摇晃盛染色原液瓶子. 吉氏染色工作液应现用现配, 切勿将未用完的吉氏 染色工作液倒回原液瓶中. WS/T 569―2017

7 C C 附录C(资料性附录) 染色方法 C.1 单张血涂片染色法 C.1.1 3%吉氏染液染色法 C.1.1.1 把薄血膜经甲醇固定的血涂片血膜朝上水平放置在染色盘中. C.1.1.2 用吸管吸取新配制的3%吉氏染液约3mL,滴加于厚、薄血膜上,至染液均匀覆盖血膜但不溢出 为止. C.1.1.3 静置染色约30min. C.1.1.4 将染色盘移至冲水池,用缓慢流水沿血涂片上缘冲洗约1min. C.1.2 10%吉氏染液快速染色法 C.1.2.1 把薄血膜经甲醇固定的血涂片血膜朝上水平放置在染色盘上. C.1.2.2 用吸管吸取新配制的10%吉氏染液约3mL,滴加于厚、薄血膜上,至染液均匀覆盖血膜但不溢出 为止. C.1.2.3 静置染色约8 min~10 min. C.1.2.4 将染色盘移至冲水池,沿血涂片上缘用缓慢流水冲洗约1 min. C.1.2.5 将染色后的血涂片血膜朝下插入血片干燥架,晾干. C.2 成批血涂片染色法 C.2.1 将每张血涂片的血膜朝一个方向插入染色缸中,或将血涂片血膜朝外成对插入染色缸中. C.2.2 倒入新配制的2%吉氏染液浸没厚、薄血膜. C.2.3 静置染色约30 min. C.2.4 向染色缸中注入自来水或PBS缓冲液至溢出,除去染液表面浮渣,将染色缸中残余的染液倾出, 加入新水,缓慢冲洗2次~3次. C.2.5 取出血涂片,血........