PDF《百合科多 肉植物美吉寿 的组织培 养与快速 繁殖》

植物 生理学通讯 第44卷 第l期,2

0 0 8年 2月 l

2 3 百合科多肉植物美吉寿的组织培养与快速繁殖 王泉 ,左志宇 ,宋晓涛 ,张耀 ,张昊鹏 ,尹晓爽 ,安晓云 ,杨雪1 ,

2 孙涛 ・ '

3 1 天津102中学生物 教研 室,天津

3 0

0 1

6 1 : 南开大 学生命 科学学 院 ,天 津300060:, 天津 医科大 学基础 医学 院,天津300070Ti s s u e C u l t u r e a n d Ra p i d P r o p a g a t i o n o f Ha w o r t h i a e me l y a e v a r .

ma j o r f , G. G. S mi t h ) M. B. Ba y e r WA NG Qu a n , Z U O Z h i ― Y u , S O NG Xi a o ― T a o , Z H ANG Y a o , Z H AN G Ha o ― P e n g , YI N X i a o ― S h u a n g , AN Xi a o ― Y u n , Y A N G Xu e 一.SUN T a o , , T e c h i n g a n d R e s e a r c h S e c t i o n o f B i o l o g y , T i a n j i n

1 0

2 Mi d d l e S c h o o l , T i a n j i n

3 0

0 1

6 1 , C h i n a ;

C o l l e g e o fL i f e S c i e n c e s , N a n k a i U n i v e r s i t y , T i a n j i n

3 0

0 0

6 0 , C h i n a ;

C o l l e g e o fB a s i c Me d i c i n e , T i a n j i n Me d i c a l U n i v e r s i t y , T i a n j i n

3 0

0 0

7 0 , C h i n a 1植物名称 Ha w o r t h i a e me l y a e v a t . m a j o r ( G. G. S mi t h ) M . B. Ba y e r ,中文 惯称 美 吉寿 .

2 材料类别 成年美 吉寿春生花茎子房部位 ,实验材料 来源于Me s a g a r d e n公司.3培养条件 (

1 ) 启动培养基:MS +

6 - B A0 .

5 m g . L ( 单 位下同) + K T I + NA A

0 .

1 ;

(

2 ) 分化培养基:MS +

6 - B A l + K T

2 ;

(

3 ) 继代与增殖培养基:MS +

6 - B A

0 .

5 + N A A

0 .

0 5 ;

(

4 ) 复壮与生根培养基:1 /

2 MS + N A A

0 .

1 .以上 培养基均加入

3 %蔗糖和

0 .

6 %倍力凝( P o l y g e

1 ) ,p H

5 .

8 .培养温度为(

2 5 +

2 )℃,光照时间

8 h . d ~ ,总 光照强度约为6 0~ t mo

1 . m-

2 . s ~ .

4 生长与分化情况

4 . 1无菌材料的获得 选取温室内栽种 的成年植株, 取其春生花茎上半部( 充分保 留顶端花蕾及其子房 部) ,经流水冲洗

3 0 mi n以上 ,超净 台上 以0 .

1 % Hg C

1 , 溶液( p H调至 中性后加入

0 .

0 5 % T w e e n .

2 0 ) 浸泡

5 mi n ,无菌水再冲洗 6次 .将 消毒 的材料 置于无菌滤纸上,分离单个花蕾子房部位作为外 植体.4.2启动培养 将 外植体接入培养基(

1 ) 上,1

4 d 后,子房部显著膨大并有少量浅绿色愈伤组织形 成;

4

0 d后 ,子房部膨胀至表 皮裂 开,形成大 量愈伤组织 ;

6

0 d后 ,愈伤 组织绿 色加深 ,增 殖速度增快,周边可见无色愈伤组织并逐渐玻璃 化坏死.愈伤组织中绿色较深 的部位具有较强的 增殖能力 ,传代并分离绿色愈伤组织使其继续增 殖并用于后期分化培养 .

4 .

3 分化培养 将上述绿色愈伤组织转入培养基(

2 ) 中 ,约

6 0 d后愈伤 组织 上绿色较深 部位 开始 分化,逐渐形成多个 圆形隆起 并陆续分化为单个幼 芽 ;

再 经过15d后 ,可形成能够辨认的单生芽或由

3 ~ 7个幼芽组成的群生芽( 图1),将其分割后 可用于继 代培养 . 图 1美吉寿 的分化培养

4 .

4 芽的增殖 将上述 培养物转入增殖基(

3 ) 上, 大约

4 0 d后 ,形成丛 生苗 .将苗丛分割后转入 新培 养基 ,可实现 快速 增殖 ,芽基 部略 隆起膨 大 ,植株较 易分 离 ,每 株苗 基部有 大量侧 芽分布.继代周期为

4 0 ~

5 0 d ,此 时苗 的繁殖系数可 达到